24小时热门版块排行榜    

查看: 2744  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

c_yl

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助~~~~~PCR产物条带分析

我做的是PCR温度梯度,反向引物设计了两个,图片上六个条带两个两个是一组,总共三组,但是疑惑的是第四个条带怎么突然很亮,而且还不知道哪个温度比较适合

79 条件 3.27.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c_yl

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lily7a26 at 2013-03-29 22:34:58
看溴酚蓝的位置在很上面,说明条带分子量很小,电泳电压低,导致样品弥散,条带我怀疑是引物二聚体,而非目的条带。建议先跑touchdown,确定引物能够跑出来,再慢慢摸索具体的温度。

什么是touchdown?新手,不懂。。。
7楼2013-03-31 09:53:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-03-30 03:58:38
其实做实验 目的达到就好
不必要非选出最佳的温度
你可以直接做一个touchdown来P你的条带
检测出结果如果条带很亮就说明你P的浓度高
但是确实也不影响你后续的实验吧
你这个突然很亮的原因我猜测也不一定就是温度低呃影响 毕竟3号不一样
所以可能就是偶然性结果导致的  比如说这管的酶的浓度刚好是下层的没有混匀导致酶多产物浓度高
做出色的科研人
2楼2013-03-29 20:13:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱上文慧

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你有没有感觉3、4泳道还有微弱的杂带?是不是退火温度太低了出现的非特异性条带?
分子实验偶然性太大了,郁闷!
每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
3楼2013-03-29 21:57:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
c_yl(gyesang代发): 金币+1, 鼓励帮助楼主分析问题! 2013-05-01 21:00:57
本帖仅楼主可见
4楼2013-03-29 22:34:58
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +4 yuleib84 2026-08-25 5/250 2026-08-25 14:19 by xuqiangluo
[基金申请] 什么时候开奖? +11 CrisMessi 2026-08-18 12/600 2026-08-25 14:02 by monkeynana
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 +3 ziyangfang 2026-08-25 3/150 2026-08-25 13:14 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 明天应该可查了!? +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
信息提示
请填处理意见