应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 目的基因连接表达载体的质粒PCR验证，结果出现2条带
51/1返回列表
查看: 4955  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[交流] 目的基因连接表达载体的质粒PCR验证，结果出现2条带

目的基因连接表达载体的质粒PCR验证，结果出现2条带，其中一条和我的基因大小一致，还多了一条3000左右的条带，有哪位高手遇到过这样的问题？两次连接得到的质粒双酶切都没有得到我的目的基因大小一致的条带，同单酶切的条带是一样的。这种情况到底连没连上呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-26 19:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuding6

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
先送几个克隆测序再说
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-27 09:37:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

hs19880208

新虫 (初入文坛)
★ ★
yuguiyan(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 14:58:03
1. 看看是不是你的引物浓度过高，出现了二聚体。2.看看你的酶切位点是不是合理。3.看看你的表达载体。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-26 19:19:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hs19880208 at 2013-03-26 19:19:00
1. 看看是不是你的引物浓度过高，出现了二聚体。2.看看你的酶切位点是不是合理。3.看看你的表达载体。

表达载体怎么看是不是好用啊？
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-26 19:21:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 14:58:13
PCR结果有时候出现假阳性，用于快速检测。质粒酶切鉴定更准确，从双酶切和单酶切条带一样来看，我觉得你可能是没有连上。此外，单酶切出来的条带大小和载体单酶切是否相同？如果一样，就是空载体，目的片段没有连上。
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-27 07:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭