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afen2004

新虫 (小有名气)

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虫号: 325427
注册: 2007-03-17
专业: 药剂学

[求助] 5‘端和3’端如何获得？

目前在扩基因，总长大概接近800bp，已扩了部分中间序列560-580，现在在扩两端，5‘端用了5-race试剂盒，一直做不出来，3-端设计了中间引物和ENDt扩下游，总扩不出条带。求助，有没有其他合适的方法？可以扩全长？从开过年就在做这个到现在一点进展都没有。而且又是菜鸟。

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1楼 2013-03-26 10:07:56

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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)

巫山云

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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afen2004: 金币+4 2013-03-27 06:30:23
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 14:51:54

560-850之间的序列是怎么扩出来的？
设计涵盖这800bp范围的引物，普通pcr该是可以扩出来，不济就来一个高保真pcr mix扩一扩；
若是race试剂盒都搞不定，想来是不容易弄出来；

锤之千古

2楼2013-03-26 15:23:33

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