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afen2004

新虫 (小有名气)

[求助] 5‘端和3’端如何获得?

目前在扩基因,总长大概接近800bp,已扩了部分中间序列560-580,现在在扩两端,5‘端用了5-race试剂盒,一直做不出来,3-端设计了中间引物和ENDt扩下游,总扩不出条带。求助,有没有其他合适的方法?可以扩全长?从开过年就在做这个到现在一点进展都没有。而且又是菜鸟。
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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)

巫山云

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
afen2004: 金币+4 2013-03-27 06:30:23
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-27 14:51:54
560-850之间的序列是怎么扩出来的?
设计涵盖这800bp范围的引物,普通pcr该是可以扩出来,不济就来一个高保真pcr mix扩一扩;
若是race试剂盒都搞不定,想来是不容易弄出来;
锤之千古
2楼2013-03-26 15:23:33
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