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tear果冻

金虫 (正式写手)

[求助] 新手一枚,大家帮忙分析一下我的高效液相图谱。O(∩_∩)O谢谢

本人菜鸟一枚,最近做了很久实验,结果都不好,请各位童鞋帮帮忙。十分感谢。第一张图是,乙腈:水(0.1%磷酸)=90:10。样品的图谱。第二张图是白桦脂酸,保留时间9.119分钟。第三张图谱是白桦脂醇,保留时间11.361分钟。白桦脂酸和样品对上了,但是白桦醇没有对上。样品中有三个峰,分不开。试过乙腈:水=82:18,乙腈:水=84:16,乙腈:水=86;14,乙腈:水=88:12,乙腈:水=90:12,乙腈:水=92:8。只有乙腈:水=90:10,白桦酸可以和样品对上。以上流动相全都试过,白桦醇始终和样品对不上。然后我试过乙腈:甲醇:水=70:20:10.发现白桦醇和白桦酸保留时间只差0.45分钟。两个对照品都分不开。昨天跑了梯度,白桦脂醇保留时间27.182分钟。样品保留时间27.435分钟。发现白桦醇和样品对上了,但是样品峰不对称,这是不是可能样品室两个峰没有分开呢?请大家帮忙修改一下梯度的条件,十分感谢。
我的梯度条件是:0-10分钟 乙腈:水=70:30,
                15分钟   乙腈:水=75:25
                             20分钟   乙腈:水=80:20,
                30分钟   乙腈:水=90:10     
                             40分钟   乙腈:水=90:10  
                             45分钟   乙腈:水=95:5
                              50分钟   stop

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tear果冻

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 辣笔v小新 at 2013-03-24 06:54:15
★梯度洗脱的缺点:常会引起基线漂移,且梯度洗脱的重现性较差>>>

。我想加点酸,来改善一下峰型
9楼2013-03-24 13:13:26
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查看全部 9 个回答

tear果冻

金虫 (正式写手)

我的流速1ml/min,柱温25度,c18柱,白桦脂酸,白桦脂醇都是五环三萜类。大家帮帮忙,指点一下怎么改善梯度条件。O(∩_∩)O谢谢
2楼2013-03-23 14:38:37
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mitudefo

铁杆木虫 (职业作家)

没有跑过你这种成分的东西,你还是问问经常做这类物质的实验室人员吧,多摸摸条件吧。
感悟生活,体味人生。
3楼2013-03-23 14:51:23
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tear果冻

金虫 (正式写手)

我的检测波长是210nm,流速1ml/min,柱温25度。3.5分钟之前全是溶剂峰。大侠帮忙给我梯度的条件提点意见吧。昨天跑了梯度,白桦脂醇保留时间27.182分钟。样品保留时间27.435分钟。样品27.435分钟分离度2.1,拖尾因子0.79。发现白桦醇和样品对上了,但是样品峰不对称,这是不是可能样品室两个峰没有分开呢?
5楼2013-03-23 15:38:30
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