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1466822597

银虫 (小有名气)

[求助] 怎么我养的细胞容易漂?

最近刚开始养肿瘤细胞,MCF-7,Bxpc-3,C26,等不同的细胞都再养。但本人技术不行。总是会有一点漂的,所有的都漂,用的不同培养基的也漂。真心困扰我,担心实验做不好。
试验方法是参照网上和以前同学的。先消化,再离心,加入培养基,然后传代。在生物安全柜操作。全部东西灭菌。
可还是有问题!

想请养细胞的高手说说,还有什么注意事项,你们以前遇到过这种问题不?一般是哪里出了问题。
求指导!!!!!
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nlbtr

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by 1466822597 at 2013-04-15 19:25:11
你是说这属于支原体污染吗?
支原体污染一般会导致什么后果呢?...

培养液一般会浑浊,支原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。
18楼2013-04-16 10:01:17
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美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-03-23 08:09:38
如果你说的是刚传代时细胞贴壁不好,就增加血清浓度,如果是培养一两天后,你就需要改善细胞培养环境了
2楼2013-03-22 15:57:17
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-23 08:09:30
胰酶消化时间不能太久;消化完成后,对无法直接拍落的细胞,吹打不要太猛;血清非常关键,选择声誉好的牌子,且浓度不宜过低;细胞数量不能过多,否则必然会飘。
另外,培养瓶和培养皿也要注意。玻璃培养瓶必须充分洁净,一次性产品选个好牌子就行了,比如Corning、耐思都可以。
3楼2013-03-22 19:37:11
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cby-1979

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你养别的细胞都没问题的话,那只可能是培养基或是细胞的问题,肿瘤细胞一般挺好养的,可以做些对照,找找原因。另外,消化确实和人、细胞都有关系,你得多做去摸索。
虫小力气大
4楼2013-03-28 07:46:00
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