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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 怎么我养的细胞容易漂？
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1466822597

银虫 (小有名气)

[求助] 怎么我养的细胞容易漂？

最近刚开始养肿瘤细胞，MCF-7，Bxpc-3，C26，等不同的细胞都再养。但本人技术不行。总是会有一点漂的，所有的都漂，用的不同培养基的也漂。真心困扰我，担心实验做不好。
试验方法是参照网上和以前同学的。先消化，再离心，加入培养基，然后传代。在生物安全柜操作。全部东西灭菌。
可还是有问题！

想请养细胞的高手说说，还有什么注意事项，你们以前遇到过这种问题不？一般是哪里出了问题。
求指导！！！！！
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找到真爱
1楼 2013-03-22 14:51:08
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bunny0512

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1466822597: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-15 17:19:00
你说的黑点我没太看明白，是细胞里的，还是培养基里的，可以移动的？如果是细胞里的黑点儿，建议用大倍数的镜子看看，我的细胞倒是见过亮点儿，我不确定是什么，不知道是不是囊泡；如果是培养基里的黑点儿，通常就是死细胞，换液之后就能减少，PBS洗后换液应该更少，如果很快就又有黑点儿，就是培养条件不对导致细胞死亡或者各类的污染。
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在哪里~在哪里见过你~
14楼2013-04-15 14:52:56
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美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-03-23 08:09:38
如果你说的是刚传代时细胞贴壁不好，就增加血清浓度，如果是培养一两天后，你就需要改善细胞培养环境了
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2楼2013-03-22 15:57:17
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-23 08:09:30
胰酶消化时间不能太久；消化完成后，对无法直接拍落的细胞，吹打不要太猛；血清非常关键，选择声誉好的牌子，且浓度不宜过低；细胞数量不能过多，否则必然会飘。
另外，培养瓶和培养皿也要注意。玻璃培养瓶必须充分洁净，一次性产品选个好牌子就行了，比如Corning、耐思都可以。
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3楼2013-03-22 19:37:11
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cby-1979

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你养别的细胞都没问题的话，那只可能是培养基或是细胞的问题，肿瘤细胞一般挺好养的，可以做些对照，找找原因。另外，消化确实和人、细胞都有关系，你得多做去摸索。
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虫小力气大
4楼2013-03-28 07:46:00
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