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王之御魂

木虫 (小有名气)

[求助] 菌丝超声破碎问题

最近实验过程中想破碎真菌菌丝,请教前辈们超声波破碎如何设置,大概超声几秒停几秒,总时间大概设多少较好。另外我的培养基中加了些农业废料(秸秆,麸皮一类的),菌丝和农业废料缠绕在一起,请问这样对超声破碎有影响么?想不到什么好方法把菌丝和农业废料分开,若前辈有经验不吝赐教,谢谢
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王之御魂

木虫 (小有名气)

看了下相关帖子,真菌菌丝细胞壁不容易破碎,需要结合其他方法破碎吗?或者加入一些溶壁酶
2楼2013-03-21 09:11:37
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
王之御魂: 金币+1 2013-03-21 10:37:22
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-03-22 14:34:31
可以试试蜗牛消化酶。。
聪明才智要为意外做准备~~
3楼2013-03-21 09:13:17
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
王之御魂: 金币+1 2013-03-21 10:37:28
相比于细菌或细胞,真菌需要特定酶。但多年没有干微生物,具体忘了
4楼2013-03-21 09:41:02
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lvxingan1989

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2013-03-22 14:34:55
其实得看你要提取什么物质,如果你的提取物质能稳定性够好,那你的超声频率大一些也没多大关系
还有就是你的菌丝和农业废料可以通过筛子离心一下,先是把菌丝和肥料混合物+碎玻璃,震荡碎打个半小时或1小时,然后再用普通棉花或是大孔筛子过滤...有利于分离和超声效果
其次你可以加一些溶菌酶,如果这个物质不影响你后续的分离纯化的话,结合超声破碎效果肯定更好

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实验一般叫人很纠结..
5楼2013-03-21 10:50:11
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王之御魂

木虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by lvxingan1989 at 2013-03-21 10:50:11
其实得看你要提取什么物质,如果你的提取物质能稳定性够好,那你的超声频率大一些也没多大关系
还有就是你的菌丝和农业废料可以通过筛子离心一下,先是把菌丝和肥料混合物+碎玻璃,震荡碎打个半小时或1小时,然后再 ...

如果是要提取胞内的一些酶大概设置多少频率?
6楼2013-03-21 10:54:10
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lvxingan1989

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 王之御魂 at 2013-03-21 10:54:10
如果是要提取胞内的一些酶大概设置多少频率?...

额,这个我也没做过你这个真菌,也不太说的上来,你自己看看外文文献呗,应该很多的呀
实验一般叫人很纠结..
7楼2013-03-21 11:54:00
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chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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王之御魂: 金币+18, ★★★很有帮助 2013-03-25 11:42:34
超声对蛋白质酶的影响来自俩方面,一个是超生功率强度,另一个是超生过程产生的热量。这个功率你可以你摸索一下了。一般应该在300W以下的超生功率吧,功率过大蛋白容结构容易破坏,另一个局部产热一个通过用冰浴降温,另一个就是超生时间要短,间歇时间长点,如超生2秒停4秒或超1秒停两秒,总之你自己通过酶活变化,自己定工艺啊。
8楼2013-03-22 10:51:51
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