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2011210200

金虫 (小有名气)

[求助] 土壤总DNA扩16s rDNA片段,电泳没有条带,是什么原因啊?郁闷死了……

土壤总DNA提取后,扩增16s rDNA某一片段去跑DGGE,引物用的 27F、GC-338R,PCR程序为95、5min、1 cycle;30cycles of 95,20s,60,30s,72,30s;72,5 min,1cycle;用DNA模板做了不同的浓度梯度进行PCR,但是电泳后全部都没有明显条带,想请教一下各位到底是哪个地方出错了?要从哪些地方改善啊?是不是引物有问题?
DNA模板绝对不存在问题,电泳条带非常明显。

[ Last edited by 2011210200 on 2013-3-17 at 20:11 ]
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