24小时热门版块排行榜    

查看: 4063  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] miRNA反转录总是效果很差

miRNA反转录总是效果很差,加尾法试过10条miRNA只有1个引物凑合能用,茎环法14条miRNA只有3条引物能用,试验做不下去了,谁能有效的帮我设计一下引物啊?我的试验材料是小麦。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Myre-Y0Y0

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by machao8405 at 2013-09-18 08:53:21
普通RNA反转录用的是随机引物,即里面的所有RNA都发转录,颈环法只反转录出来目的小RNA,你的条带不亮可能是表达量本来就低或者本身分子量很小,本来就没法跟大的RNA相比...

那就是说、我的条带不亮是表达量低的原因,结果是正常的么?只要条带是特意条带就可以了嘛?
8楼2013-09-18 10:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

这是马甲

至尊木虫 (著名写手)

谁的马甲都不是

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-17 16:38:29
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物,不知道楼主所说的效果很差是什么意思,动物上反转引物的设计有固定的通用序列,再加上几个miRNA特有的碱基即可,我反转了10来个,效果都还不错
这是一只什么都不懂的马甲~~~
2楼2013-09-17 09:17:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 这是马甲 at 2013-09-17 09:17:36
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物,不知道楼主所说的效果很差是什么意思,动物上反转引物的设计有固定的通用序列,再加上几个miRNA特有的碱基即可,我反转了10来个,效果都还不错

试验已经顺利完成了
3楼2013-09-17 20:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Myre-Y0Y0

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by machao8405 at 2013-09-17 20:53:45
试验已经顺利完成了...

卤煮咋做的、我用的茎环引物反转录,可是我的目的条带相当不亮啊、microRNA的反转录和其他的反转录有什么区别么?
4楼2013-09-18 08:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见