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长毛

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR电泳内参条带亮度不一(急求)

如图啊,内参用的是GAPDH,条件是实验室常用的,应该没什么问题
组织提取的RNA,P完之后跑电泳条带就这样了
PCR体系是 水10ul.
                酶12.5ul
               上下游引物各0.75ul
               cDNA 1ul
可最后电泳内参亮的,下面的bp小的模糊的东西(这是什么,不是引物二聚体吧)少的内参条带就亮,模糊条带多的内参就暗
请教各位大虾,老师啊,怎么能改善这个问题,减少模糊条带让内参都亮起来呢
急求,不胜感谢

G3,G4.JPG
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR条件没有达到最优或者引物质量不好。下面模糊的是引物二聚体。
2楼2013-03-15 00:28:18
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