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长毛

新虫 (初入文坛)

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专业: 药物分析

[求助] PCR电泳内参条带亮度不一（急求）

如图啊，内参用的是GAPDH，条件是实验室常用的，应该没什么问题
组织提取的RNA，P完之后跑电泳条带就这样了
PCR体系是水10ul.
            酶12.5ul
            上下游引物各0.75ul
            cDNA 1ul
可最后电泳内参亮的，下面的bp小的模糊的东西（这是什么，不是引物二聚体吧）少的内参条带就亮，模糊条带多的内参就暗
请教各位大虾，老师啊，怎么能改善这个问题，减少模糊条带让内参都亮起来呢
急求，不胜感谢

G3，G4.JPG

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1楼2013-03-14 17:21:07

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
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红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

PCR条件没有达到最优或者引物质量不好。下面模糊的是引物二聚体。

2楼2013-03-15 00:28:18

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