应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 共表达酶的优化问题
51/1返回列表
查看: 1171  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

梦羽89

新虫 (初入文坛)

[求助] 共表达酶的优化问题

老板让做共表达质粒的产木聚糖酶和葡萄糖醛酸酶的优化，一个质粒是PET-20b-xynB-PHsh-aguA，另外一个是PET-20b-xynB-rbs-aguA（注：xynB为木聚糖酶，aguA为葡萄糖醛酸酶），区别就是前一个质粒两个启动子，可以调节产酶比例。我的实验目的就是通过优化使得两种酶的产量高，并且还要使得两种酶的产酶比例最佳，也就是酶解效率高。现在已经做完不同诱导条件的单因素优化（诱导剂种类，诱导剂浓度，诱导时间，诱导温度等），但是产酶量高的酶解效率不高，酶解效率好的吧，产酶量又低。请问有哪位大侠提示一下，接下来我该设计怎养的思路才能继续讲实验进行下去？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

研究

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-11 21:00:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2013-03-15 08:18:49
取决于你对比例的要求是否严格，如果只是特定的要求1比2的简单倍数，可考虑将基因简单重复倍加串联起来。也可以考虑加入GFP在复合酶上或者单一酶上，以测定荧光度检测复合酶或者单一酶的表达程度。达到一定程度加入抑制剂即可。
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-14 20:15:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

biosci

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是有要求要用活菌催化反应吗？还是出来后，破碎上清液催化
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-12 09:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦羽89

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2013-03-12 09:17:29
你是有要求要用活菌催化反应吗？还是出来后，破碎上清液催化

我是破细胞取上清啊
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-12 14:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

那分别表达不行？非得弄到一个细胞里面吗？
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-14 10:22:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否申诉？ +4 echo8914667 2026-08-30 5/250 2026-08-30 21:11 by echo8914667
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 3/150 2026-08-30 20:10 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:35 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:53 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:20 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:07 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 17:14 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 面上意见出来了 +9 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 18/900 2026-08-30 16:47 by 黄鸟于飞Chao
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 14:03 by GkCVyODlx4mR
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭