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guipaishou

铜虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切后液体回收

我在做基因连接,一直没有成功。咨询了一个大神,她告诉我双酶切之后不做胶回收,而是做液体回收。搜索很久不知道液体回收的具体含义,是不是就是就PCR纯化试剂盒进行回收啊?求助大家了。

[ Last edited by wizardfan on 2013-3-12 at 07:10 ]
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wenzi6337

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接回收是要看你酶切的情况的,如果单酶切且仅切一刀,可以直接将酶切产物稀释至100μl左右,按照凝胶回收试剂盒操作说明直接回收,如果是切两刀,而且非回收片段较大(>70bp),需要切胶回收。
2楼2013-03-11 12:04:09
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熊大斌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分析 2013-03-12 07:09:28
最好还是做切胶回收吧,因为你是双酶切,正常情况下,酶切完全后,跑胶会有两个片段,其中有一条是你需要回收的目的片段,如果用液体回收,切后的两个片段都被回收,再进行连接的话,二者又会连接起来,之前的酶切就白做了。
3楼2013-03-11 16:33:04
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生命

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

内容已删除
守恒!!!
4楼2013-03-19 00:01:09
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