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cnb1987

银虫 (小有名气)

[求助] 做荧光定量时看家基因的CT值?

大家好,最近在做荧光定量,做了几次之后,发现看家基因的CT值都在30左右,是不是我的模版量加的太少还是cDNA有问题?,一般三个重复三个,有的品均值值还在33左右,大家能给我点意见么?
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cnb1987

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-08 11:14:16
PCR时加大cDNA用量或者逆转录时增加RNA用量。

嗯,好的,我再加点模版尝试一下!
5楼2013-03-08 12:25:59
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查看全部 9 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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cnb1987: 金币+2, 有帮助 2013-03-08 12:26:05
PCR时加大cDNA用量或者逆转录时增加RNA用量。
2楼2013-03-08 11:14:16
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cnb1987: 金币+2, 有帮助 2013-03-08 12:26:31
那个CT值是和cDNA量相反关系,CT值越大说明模板浓度低,加大模板量,而且CT值在25-33,个人认为都可以!
寻找真正的自我!
3楼2013-03-08 11:36:46
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cnb1987: 金币+2, 有帮助 2013-03-08 12:26:44
管家基因的ct值都在30左右的话说明你的cNDA含量较低,PCR本身没有问题,解决方法上面的两位说的都很有理
生物化学与分子生物学
4楼2013-03-08 11:58:46
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