24小时热门版块排行榜    

查看: 4891  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lu78wi

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于pET32a的HIS标签

pET32a中有2个His标签,我将我的序列插入他们之间,可是由于疏忽把下游的终止密码子没有去掉,使与我要表达蛋白下游紧邻的his不能表达,这样会不会造成后期蛋白纯化困难,我是要制备多抗。我要不要现在就重新设计下游引物?
谢谢前辈们。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lu78wi

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-08 15:33:56
理论上两个tag可能与柱子结合更紧,实际操作上要看标签是暴露在蛋白表面还是包埋在内部。是否可以纯化到蛋白要等做出表达后实验得知。...

我的蛋白是要为后续做多抗用的,那判断这个蛋白是否是我需要的目的蛋白只能通过看电泳后大小呢?
8楼2013-03-08 16:54:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

无为书生

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只要表达带有一个His标签就能够纯化的。
2楼2013-03-08 10:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般都是带一个his tag的,载体上有两个是方便克隆的,没必要都留着。
3楼2013-03-08 11:25:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lu78wi

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-08 11:25:04
一般都是带一个his tag的,载体上有两个是方便克隆的,没必要都留着。

那对纯化效率影响会不会很大?
4楼2013-03-08 11:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +6 苏东坡二世 2026-08-23 6/300 2026-08-27 13:57 by zhangjianl
[基金申请] 青基如何破局 +3 lyz123lyz 2026-08-27 4/200 2026-08-27 13:08 by kulium
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +5 Kittylucky 2026-08-27 5/250 2026-08-27 12:10 by 姜太公烤鱼
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见