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mahoumeimei金虫 (小有名气)
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荧光定量PCR-绝对定量
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最近想通过定量PCR来分析不同时期体系中目标微生物的含量变化，主要是针对DNA做绝对定量。但看了一些资料后，有一点疑问。 做绝对定量事先不是需要制备质粒标准品来做标准曲线吗。资料上是说，通过克隆制备，提取出来的质粒DNA通过分光光度计测定浓度，再根据质量信息换算成目标基因含量，再稀释做标准曲线，得到目标基因含量和Ct值的关系。 可是我不明白，既然通过测定样品浓度就可以计算出目标基因的含量，为什么还要多此一举，做定量PCR呢？或者说，定量PCR的意义不仅仅是这样，但如果我的目的就是得到目的基因含量的话，其实是不需要做定量PCR的？ 新手学习中，希望大家给点建议。非常感谢！ |
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