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RamanGG

银虫 (小有名气)

[交流] 银纳米与DNA嫁接问题

最近在使用如下方法进行银纳米与DNA的嫁接：

    1. 1ml银纳米与一定量DNA（0.5微摩）和MgCl2（0.25毫摩）混合后室温下反应过夜。
    2. 使用短链带巯基-PEG（20微摩）修饰已嫁接DNA的银纳米10分钟后，使用10 mM (Tris)-HCl buffer solution (pH 8.0) 缓冲液清洗移除多余DNA和PEG。
    3. 向步骤2中制备好的DNA修饰的银纳米中逐步加入NaCl （50 mM ）和 MgCl2（2.5 mM）的盐，和互补链DNA使其杂交。

该过程中遇到3个问题，请教各位虫友：

1. 除了向DNA修饰的银纳米中加一定量盐，不出现聚集。这一方法外还有其他方法能直接证明DNA已通过硫金键修饰在银纳米上吗？
2. 在实验过程中发现DNA的loading效率很低，只有少数DNA嫁接在了银纳米表面，请问有没有什么好办法促进DNA嫁接？
3. 为何DNA杂交效率非常低？有什么好办法能促进杂交？

非常感谢各位虫友的帮助，如有相关有价值的参考文献也请推荐一下，谢谢！
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1楼 2013-03-05 21:12:31
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xiaoguabu

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我和你用了 类似的方法，问题也是一样结合效率很低啊，为什么啊。。而且银很容易聚集下来。。
证明dna 结合上了纳米银，可以测量紫外-可见光的吸收曲线，可以看到DNA的共振峰，，纳米银的峰前面
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2楼2014-01-06 18:09:33
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xiaoguabu

新虫 (小有名气)
如果是有荧光标记的，就可以测荧光的量，，就可以判断了
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3楼2014-01-06 18:10:47
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