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RamanGG

银虫 (小有名气)


[交流] 银纳米与DNA嫁接问题

最近在使用如下方法进行银纳米与DNA的嫁接:

    1. 1ml银纳米与一定量DNA(0.5微摩)和MgCl2(0.25毫摩)混合后室温下反应过夜。
    2. 使用短链带巯基-PEG(20微摩)修饰已嫁接DNA的银纳米10分钟后,使用10 mM (Tris)-HCl buffer solution (pH 8.0) 缓冲液清洗移除多余DNA和PEG。
    3. 向步骤2中制备好的DNA修饰的银纳米中逐步加入NaCl (50 mM )和 MgCl2(2.5 mM)的盐,和互补链DNA使其杂交。

该过程中遇到3个问题,请教各位虫友:

1. 除了向DNA修饰的银纳米中加一定量盐,不出现聚集。这一方法外还有其他方法能直接证明DNA已通过硫金键修饰在银纳米上吗?
2. 在实验过程中发现DNA的loading效率很低,只有少数DNA嫁接在了银纳米表面,请问有没有什么好办法促进DNA嫁接?
3. 为何DNA杂交效率非常低?有什么好办法能促进杂交?

非常感谢各位虫友的帮助,如有相关有价值的参考文献也请推荐一下,谢谢!
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xiaoguabu

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我和你用了 类似的方法,问题也是一样结合效率很低啊,为什么啊。。而且银很容易聚集下来。。
证明dna 结合上了纳米银,可以测量紫外-可见光的吸收曲线,可以看到DNA的共振峰,,纳米银的峰前面
2楼2014-01-06 18:09:33
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xiaoguabu

新虫 (小有名气)


如果是有荧光标记的,就可以测荧光的量,,就可以判断了
3楼2014-01-06 18:10:47
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