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nickey910

木虫之王 (职业作家)


[交流] 怎样保证离体大鼠脑组织中ATP不被分解?

各位战友,有谁做过脑缺血再灌注试验,离体脑组织中ATP的液相含量测定,怎样保证离体大鼠脑组织中ATP不被分解,现在我用的样品处理方法是取0.3g脑组织,立即用0.5mol/L高氯酸溶液2ml在冰水浴充分匀浆静置10min,0~4℃以3000rpm离心10min,取上清加入0.5mol/L氢氧化钾调ph为6.5,再以10000rpm离心10min,取上清进样走液相。液相色谱条件为色谱柱Hypersil ODS C18  250mm*4.6mm,柱温40℃,检测波长254nm,流动相A:70mmol/L磷酸二氢钠+3mmol/L四丁基溴化铵(调ph6.5),流动相B:甲醇。A:B=90:10,流速1ml/min。
现在的问题是对照品出峰顺序为AMP 7.3min,ADP  14.4min,ATP  27.2min,分离效果挺好,但是样品中的ADP和ATP检测不出来,基线就是平的,很郁闷,不知是哪里出了问题,是ATP分解了吗,还是别的原因,请帮忙分析一下,非常感谢
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wy0720

铜虫 (职业作家)



nickey910(金币+1): 谢谢参与
养的兔子又死了一只,好无语阿。。。。感觉兔子还没有大鼠好养呢。。。。
7楼2013-03-06 11:59:01
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userhung

禁虫 (文学泰斗)


3楼2013-03-06 09:59:23
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nickey910(金币+1): 谢谢参与
学习啦,很有兴趣
9楼2013-03-06 17:51:22
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简单回复
2013-03-06 10:25   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
mr2010053112楼
2013-03-06 18:34   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
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