应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 怎样保证离体大鼠脑组织中ATP不被分解？
251/1返回列表
查看: 1581  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nickey910

木虫之王 (职业作家)

[交流] 怎样保证离体大鼠脑组织中ATP不被分解？

各位战友，有谁做过脑缺血再灌注试验，离体脑组织中ATP的液相含量测定，怎样保证离体大鼠脑组织中ATP不被分解，现在我用的样品处理方法是取0.3g脑组织，立即用0.5mol/L高氯酸溶液2ml在冰水浴充分匀浆静置10min，0~4℃以3000rpm离心10min，取上清加入0.5mol/L氢氧化钾调ph为6.5，再以10000rpm离心10min，取上清进样走液相。液相色谱条件为色谱柱Hypersil ODS C18  250mm*4.6mm，柱温40℃，检测波长254nm，流动相A：70mmol/L磷酸二氢钠+3mmol/L四丁基溴化铵（调ph6.5），流动相B：甲醇。A:B=90:10，流速1ml/min。
现在的问题是对照品出峰顺序为AMP 7.3min，ADP  14.4min，ATP  27.2min，分离效果挺好，但是样品中的ADP和ATP检测不出来，基线就是平的，很郁闷，不知是哪里出了问题，是ATP分解了吗，还是别的原因，请帮忙分析一下，非常感谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-05 14:42:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
请教高人
回复此楼
2楼2013-03-06 09:41:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
nickey910(金币+1): 谢谢参与
http://www.lunwentianxia.com/product.sf.3534293.1/
http://www.docin.com/p-233698921.html
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-SLYY200703067.htm
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-BQEB801.009.htm
http://wuxizazhi.cnki.net/Search/SHZD200402020.html
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-06 09:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wy0720

铜虫 (职业作家)
★
nickey910(金币+1): 谢谢参与
养的兔子又死了一只，好无语阿。。。。感觉兔子还没有大鼠好养呢。。。。
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-06 11:59:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

readytogo

荣誉版主 (文学泰斗)
★
nickey910(金币+1): 谢谢参与
学习啦，很有兴趣
回复此楼
9楼2013-03-06 17:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyuanji

银虫 (小有名气)
★
nickey910(金币+1): 谢谢参与
我们这边做过这几种物质的测定，但最终ADP没有测出来，有可能是稳定性极差。
给你一个样品前处理方法，供你参考：取大鼠心脏，称量，按一比二的比例加7%高氯酸沉淀蛋白并且匀浆，低温10000g离心20分钟，取上清，调节PH=6~7，再低温4000g离心10分钟，取上清，-200C保存。测试样本为处理好的细胞裂解液。
还有，你的色谱条件中柱温是否偏高？40摄氏度？调低试试看。
赞一下 回复此楼
15楼2013-03-07 16:59:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kk1424

主管区长 (著名写手)
★
nickey910(金币+1): 谢谢参与
好专业，坐等回答
回复此楼
16楼2013-03-07 21:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wangyuanji at 2013-03-07 16:59:18
我们这边做过这几种物质的测定，但最终ADP没有测出来，有可能是稳定性极差。
给你一个样品前处理方法，供你参考：取大鼠心脏，称量，按一比二的比例加7%高氯酸沉淀蛋白并且匀浆，低温10000g离心20分钟，取上清，调 ...

你好，谢谢你的回复。非常感谢。但是我有一个问题，我现在做的是大鼠脑缺血再灌注实验，取缺血区大脑皮层，也就是只有200到300mg，按照1:2的比例加入7%高氯酸，也就只加入600微升，这么小的量怎么用PH计测定啊？
赞一下 回复此楼
17楼2013-03-07 22:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyuanji

银虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by nickey910 at 2013-03-07 22:12:53
你好，谢谢你的回复。非常感谢。但是我有一个问题，我现在做的是大鼠脑缺血再灌注实验，取缺血区大脑皮层，也就是只有200到300mg，按照1:2的比例加入7%高氯酸，也就只加入600微升，这么小的量怎么用PH计测定啊？...

也就是调节样品酸度至中性，试纸即可。
我做的也是大鼠脑缺血再灌注方面的。可以多多交流。
赞一下 回复此楼
18楼2013-03-08 14:27:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
引用回帖:
18楼: Originally posted by wangyuanji at 2013-03-08 14:27:36
也就是调节样品酸度至中性，试纸即可。
我做的也是大鼠脑缺血再灌注方面的。可以多多交流。...

呵呵，应该向你多多学习才是。貌似pH这个环节不是太重要，只要调节成中性即可。呵呵，学习了。
赞一下 回复此楼
19楼2013-03-08 16:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
求高人
回复此楼
20楼2013-03-11 11:18:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
请教高人
回复此楼
21楼2013-03-12 08:36:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
请教高人
回复此楼
22楼2013-03-13 13:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
请高人解答
回复此楼
23楼2013-03-15 12:46:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
求高人解答
回复此楼
24楼2013-03-18 09:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nickey910

木虫之王 (职业作家)
取消求助
回复此楼
25楼2013-09-30 12:09:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
zhihaikou4楼
2013-03-06 10:24   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福
tangbohejin5楼
2013-03-06 10:25   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
wullww6楼
2013-03-06 11:04   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
zhoupeng878楼
2013-03-06 17:36   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
cfly10楼
2013-03-06 18:00   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
yaoyao14511楼
2013-03-06 18:13   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
mr2010053112楼
2013-03-06 18:34   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
wgatssd13楼
2013-03-06 19:11   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
champ14楼
2013-03-06 19:13   回复  
nickey910(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 nickey910 的主题更新
251/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭