应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » CHO表达重组抗体
81/1返回列表
查看: 1228  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zouyoutu

木虫 (正式写手)

[交流] CHO表达重组抗体

最近用CHO细胞表达重组抗体，发酵上清和Protein A纯化后的样品用非还原SDS-PAGE检测，有一条完整分子量的抗体，还有一条带少了50KD左右，应该是只有重链，没有轻链的二聚体。现正在用Westernblot验证，想问问各位虫友，有谁遇到类似的情况，能否推荐几篇文献看看。谢谢

[ Last edited by zouyoutu on 2013-3-6 at 09:45 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

David-li

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-04 21:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangyhai

金虫 (著名写手)
★
zouyoutu(金币+1): 谢谢参与
如果能在纯化的时候去除的话，应该可以继续往下做。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-05 08:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouyoutu

木虫 (正式写手)
纯化的时候是可以分开，但是有效表达量就低了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-05 08:47:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小love肖

铜虫 (初入文坛)
★
zouyoutu(金币+1): 谢谢参与
应该是重链二聚体吧，可以用阳离子交换进一步纯化，那条带就没有了
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-05 14:20:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouyoutu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小love肖 at 2013-03-05 14:20:49
应该是重链二聚体吧，可以用阳离子交换进一步纯化，那条带就没有了

确实是重链二聚体，有没有办法在发酵的时候就减少这样的二聚体？您有没有见过文献报道？谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-06 09:44:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shawne2008

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
zouyoutu(金币+1): 谢谢参与
zouyoutu: 金币+3 2013-06-17 16:18:54
引用回帖:
5楼: Originally posted by zouyoutu at 2013-03-06 09:44:36
确实是重链二聚体，有没有办法在发酵的时候就减少这样的二聚体？您有没有见过文献报道？谢谢...

您是公司还是学校啊？
发酵的时候，我建议你优化一下金属离子的浓度以及PH、温度等控制参数
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-06 20:08:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小love肖

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
zouyoutu: 金币+3 2013-06-17 16:19:00
二聚体的形成是因为在纯化过程中蛋白的二硫键被打开了，一种原因是，你的蛋白本身的结构中二硫键形成的不稳定，在PH变化的情况下，打开后就很难还原了；另一种原因就是你使用的培养基中含有还原性成分，例如DTT等，使蛋白中二硫键打开；我觉得发酵的时候应该严格控制PH，我也不知道还有什么好方法了
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-08 10:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
Language888楼
2013-03-09 08:46   回复  
zouyoutu(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 zouyoutu 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭