应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物纯化后酶切，连接
51/1返回列表
查看: 4978  |  回复: 28
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)

[交流] PCR产物纯化后酶切，连接

最近需要通过PCR产物，酶切，连接转化B L21建菌库，但是PCR产物酶切，连接转化效率很低，请问各位大虾，有没有更好的办法。引物加了保护碱基。或者更好的建库方案，谢谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

土壤真菌

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

peakg7

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-02 15:21:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by peakg7 at 2013-03-02 16:15:41
酶切效率不高，连接酶的问题？...

连接酶应该没有问题，估计是PCR片段酶切效率太低，大部分片段都没有切开。也没有办法检测。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-03-02 20:34:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 29 个回答

peakg7

新虫 (小有名气)
★
lishaohe(金币+3): 谢谢参与
送鲜花一朵
pcr产物直接回收，不要跑胶回收，效率会提高很多倍。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-02 15:30:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by peakg7 at 2013-03-02 15:30:00
pcr产物直接回收，不要跑胶回收，效率会提高很多倍。

我们就是直接回收的，片段很亮。直接用的就是PCR产物回收试剂盒
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-02 15:40:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peakg7

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lishaohe at 2013-03-02 15:40:08
我们就是直接回收的，片段很亮。直接用的就是PCR产物回收试剂盒...

酶切效率不高，连接酶的问题？
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-02 16:15:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 29 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭