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关于AML12细胞的培养问题 已有1人参与
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老板让养AML12，以前课题组里从没养过，去ATCC官网看了些相关资料，发现了几个问题： 1.官网的培养基配方中没有双抗，要加双抗吗？加多少？ 2.AML-12适宜生长的PH是多少？配好的培养基需要调PH吗？ 3.官网上关于其传代时说先要用胰酶简单冲洗细胞以清除血清中胰酶抑制剂的影响，那冲洗之后要将胰酶倒掉吗？还是冲洗之后直接再加胰酶消化？另外怎么操作才算是简单冲洗（它后面又说为避免细胞聚集不能摇晃和振动细胞）？还有，需要用PBS冲细胞吗？换液的时候要用PBS冲吗？ 4.不能吹打，摇晃细胞，只靠胰酶消化，能让细胞完全从贴壁状态变成悬浮液吗？如果不能，该如何操作？ 最后，想问下这个细胞好养吗？还有其他什么需要注意的地方吗？ 谢谢各位~~~ |
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mm3020
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【答案】应助回帖
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-17 10:02:16
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-17 10:02:16
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双抗加1% 使用的培养基pH一般在7.2~7.4左右 冲洗后的胰酶倒掉，死细胞多时用PBS冲洗，简单冲洗就是摇晃一下就行 消化时细胞开始漂时就可以加入含血清的培养基终止消化了，只要时间够长都能消化到这种状态 最后，求助AML12这株细胞，实验需要，但找不到种，望支援！不胜感激！ mail: miaohui@sina.cn急盼回音 |
2楼2014-02-16 22:15:15
