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退火温度的优化
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| 退火温度的优化，看到书上说比Tm低2-10℃的范围内，由高到低的设定同一反应体系中连续的不同循环的退火温度，可以避免同时做多个平行试验的繁琐操作，这个我没懂，能不能帮忙解释下呢 |
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a_biao
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| 楼上说的都对，举例来说：你的引物计算Tm值为58度，在支持Touchdown PCR的PCR仪里可以设定第一个循环的退火温度为68（比计算值高10度），第二个为66.第三个为64....每个循环的退火温度比前一个低1~2度，直到降到58度，并以58度继续进行PCR剩余的循环数。这样可以极大的减少非特异性的扩增。 |
4楼2013-02-28 18:25:04
