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20112012

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 17.5
帖子: 6
在线: 2.4小时
虫号: 1343775
注册: 2011-07-12
性别: MM
专业: 群落生态学

[求助] PCR条带很亮，但测序没信号已有1人参与

朋友的PCR条带跑出来很亮，但拿到测序公司测序时却总是没信号、测不出来，请问是什么原因？测的是ITS序列，测序公司美吉

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1楼 2013-02-24 16:11:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

1234567Chris

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 28.2
帖子: 8
在线: 7.8小时
虫号: 3105497
注册: 2014-04-01
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

没信号的话可能是引物有问题，可以设计一个测序引物；如果有条带，但是条带很乱的话，可能是信号太强了，可以稀释再测一下。另外，还要看看你的目的序列是否有连续碱基重复，一般超过五个重复，后面就测不通。还有一种可能是，目的序列GC含量过高，此时需要特殊测序条件，可以跟测序公司沟通。以上是我在生工半年数据分析的经验，希望能帮到你。