应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » LIVE/DEAD® BacLight™ Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度
52/1返回列表
查看: 2843  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

XXH_QB

木虫 (正式写手)

[交流] LIVE/DEAD® BacLight™ Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度 已有9人参与

如题，实验需要用LIVE/DEAD® BacLight™ Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度，文献上说的是先染色，再The stained bacteria were imaged with an epifluorescence microscope (Olympus) with a U-filter (364 nm) for imaging cells stained with both PI and DAPI and an IB filter (464 nm) for detecting cells stained with only PI。
请问染色后，定量部分具体如何操作，需要什么仪器呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-02-23 16:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫石头

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by wrq910214 at 2015-07-19 22:49:05
你好，不知道你现在解决这个问题了么？就光染完色以后用共聚焦就能拍么？不需要晾干或者别的处理么？用SRBY Green和PI能代替live/dead染料么？求大神给指点一下。...

你好，这种方法能不能染色超滤膜上的细菌，染完之后能不能在荧光显微镜下拍照观察？染色有时效性吗，染完必须立刻拍照吗，不能稍微储存一下吗，因为我们自己没有荧光显微镜，得外借，使用起来不方便。求有经验师兄师姐的帮忙指点一下
赞一下 回复此楼
20楼2016-02-16 20:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhangxingc: 金币+5, 鼓励有价值回帖，奖励一下 2013-02-25 09:09:48
使细菌尽量均匀分布于黑色膜上，黑色膜一般使用25mm的好像，

显微镜下的视野面积可以从物镜的型号得知，

数显微镜视野下的菌数，变化视野，再数，至少数10个视野以上，取平均值，

然后通过一个系数换算出膜上的细菌数。

这样数有一定的风险，就是细菌在膜上分布不均匀，尽量数很多视野，视野遍布黑色膜的各个部分。

这种方法在很多文献上可以查到。
赞一下(1人) 回复此楼
环境卫生、微生物学、卫生应急
2楼2013-02-25 08:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
几年前做过，等我回国后还要做这个实验
赞一下 回复此楼
环境卫生、微生物学、卫生应急
3楼2013-02-25 08:53:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XXH_QB

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-02-25 08:53:10
使细菌尽量均匀分布于黑色膜上，黑色膜一般使用25mm的好像，

显微镜下的视野面积可以从物镜的型号得知，

数显微镜视野下的菌数，变化视野，再数，至少数10个视野以上，取平均值，

然后通过一个系数换算出膜 ...

回答我的还是前辈啊感动~~
我需要测试两种情况下的大肠杆菌浓度：1、溶液里的E.coli浓度；2、薄膜上截留的E.coli浓度
今天上午咨询了试剂公司技术部门，他们说染色后能用荧光显微镜下照相并计数，两种情况都行（文献是这么做的，具体详细的没提到）；可是打电话给学院负责荧光显微镜的老师，他却说只能用透光的玻片来做。
    前辈说的黑色膜透光吗？哪里可以买到呢？
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-25 12:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-29 22:27 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 3/150 2026-08-29 21:35 by 4qO8zhfjr2AX
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-29 21:33 by 4qO8zhfjr2AX
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 17:31 by 4FFAWE8HcgUD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-29 17:22 by 4FFAWE8HcgUD
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:13 by jCd0dEvKHShX
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 14:03 by jCd0dEvKHShX
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭