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15261561986

金虫 (正式写手)


[交流] PQE30表达无明显目的蛋白

最近用M15/PQE30表达一段外源基因,但SDS-PAGE检测不到明显的目的条带,用BL21/pET30表达目的条带就很明显,表达了两段不同的基因都是这样,是PQE30表达条件有什么不一样的吗,我都是37℃长菌,25℃诱导的,求解释,谢谢
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
主要是promoter不一样,这种情况比较常见。
2楼2013-02-25 09:17:05
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15261561986

金虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by qgaoamtf at 2013-02-25 09:17:05
主要是promoter不一样,这种情况比较常见。

我知道PQE30是T5启动子,但是文献报道的PQE30表达我那个酶水很好的,会不会是表达条件有影响?
3楼2013-02-25 09:23:39
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)


我用M15/PQE30表达一个蛋白,同样也表达不出来,SDS-PAGE和你的差不多,换pET系统表达,条带明显。期待高手解释!
4楼2013-02-25 12:39:50
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