应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于zeocin活性的问题
91/1返回列表
查看: 2471  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

盼盼小心语

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于zeocin活性的问题 已有2人参与

最近一直在做汉逊酵母转化，用zeocin100微克每毫升抗性平板筛选，但是几次实验发现即使是野生型的酵母摇起来后涂板也能长出单菌落，并且个数很多，换过zeocin还是一样，对zeocin操作避光、低温、无盐也都做到了，是zeocin失活的原因吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-02-21 10:24:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Leo_xin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励交流！ 2013-02-23 20:13:22
我一般把固体培养基灭菌后放恒温干燥箱内，降温至50℃左右加Z+，用起来都没问题

你换过新的Zeoxin还是没用，应该不是zeoxin的问题吧
最大可能是操作中一些地方你没注意，也有可能wildtype存在问题？？平板中抗性分布均匀也有可能。

生物实验中好多现象用理论都无法解释。。。。。
赞一下(1人) 回复此楼
还有太多地方值得改进。
2楼2013-02-22 11:23:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

盼盼小心语

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Leo_xin at 2013-02-22 11:23:08
我一般把固体培养基灭菌后放恒温干燥箱内，降温至50℃左右加Z+，用起来都没问题

你换过新的Zeoxin还是没用，应该不是zeoxin的问题吧
最大可能是操作中一些地方你没注意，也有可能wildtype存在问题？？平板中抗性 ...

如果是操作不注意的话无非就是高温或者光失活了吧？倒完平板后我都是报纸包起来的。另外zeocin反复冻融是不是也容易失效啊？
赞一下 回复此楼
3楼2013-02-22 14:55:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Leo_xin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 盼盼小心语 at 2013-02-22 14:55:16
如果是操作不注意的话无非就是高温或者光失活了吧？倒完平板后我都是报纸包起来的。另外zeocin反复冻融是不是也容易失效啊？...

一般抗生素冻融，不会影响太大（你是37℃样子融的吧）
话说你存储zeoxin的时候外面包不包个锡纸什么的来避光？
赞一下 回复此楼
还有太多地方值得改进。
4楼2013-02-23 13:45:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zhangxingc: 应助指数+1, 鼓励交流 2013-02-25 09:04:46
Zeocin抗性用起来有时是麻烦一些。倒平板前，要等培养基凉到手背烫，但手心不烫的时候，大概40多度吧。避光其实还好，倒完平板吹板时不开灯就好，储存是放冰箱里就行了。另外，加入抗性后一定要摇匀。至于反复冻融的问题，其实曾经也怀疑过，保险起见，建议买回后迅速分装几管，然后冰上冻融使用，不能室温环境下使用。
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-24 12:26:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

盼盼小心语

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Leo_xin at 2013-02-23 13:45:26
一般抗生素冻融，不会影响太大（你是37℃样子融的吧）
话说你存储zeoxin的时候外面包不包个锡纸什么的来避光？...

我倒完平板后后不让平板见光，用报纸包起来。储存zeocin的时候小管子是在盒子里的，加抗生素也是等到不烫手避光操作的。搞不懂哪里出问题了呢
赞一下 回复此楼
6楼2013-02-25 08:36:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

盼盼小心语

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by reallpf at 2013-02-24 12:26:59
Zeocin抗性用起来有时是麻烦一些。倒平板前，要等培养基凉到手背烫，但手心不烫的时候，大概40多度吧。避光其实还好，倒完平板吹板时不开灯就好，储存是放冰箱里就行了。另外，加入抗性后一定要摇匀。至于反复冻融的 ...

我也试了其他的酵母，不知道是我操作的问题还是真失活了，不敢相信自己了
赞一下 回复此楼
7楼2013-02-25 08:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小春

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也遇到了这个问题，不知道楼主解决没有，这情况如果不是抗生素失效   出发菌本身莫非就有抗性了？
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-09-03 08:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小灰灰玩AFM

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是不是可以多加一点抗性，我们现在用的是250微克的抗性板子，感觉长的效果还是不错的
赞一下 回复此楼
9楼2016-02-22 14:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 盼盼小心语 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +5 瞬息宇宙 2026-09-01 11/550 2026-09-02 14:15 by simwe390
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭