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zhouni923219

铜虫 (正式写手)

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[求助] 毕赤酵母重组子的筛选

各位大虾们好，我做的是毕赤酵母，由于转化时载体片段越大就越难整合，但是我又不想用pPICZα载体，所以我想用对pPIC9K载体进行改造，将他缩小，His基因很大，可不可以将His去掉，宿主菌不用组氨酸缺陷型，直接利用G418抗性筛选重组子呢？请求各位知道。

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坚持，加油！

1楼 2013-01-22 15:32:02

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嘉笛

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【答案】应助回帖

★ ★
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zhouni923219: 金币+2 2013-06-18 16:37:30

G418筛选不容易筛到阳性菌落

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2楼2013-01-23 11:31:08

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嘉笛

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【答案】应助回帖

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zhouni923219: 金币+5, 谢谢您 2013-01-24 10:34:22
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2013-01-25 09:26:26
zhouni923219: 金币+2, ★有帮助 2013-02-26 10:56:15
zhouni923219: 金币+1 2013-06-18 16:37:41

pPICZa载体转化后没有组氨酸抗性转化得到的重组菌落直接进行诱导表达，如果pPIC9K载体去掉His，理论上转化子会很少，不利于后期筛选高拷贝重组子

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4楼2013-01-24 09:09:23

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