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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 多糖抗氧化测DPPH清除率实验的问题
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七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] 多糖抗氧化测DPPH清除率实验的问题 已有1人参与

今天做了多糖抗氧化测DPPH的实验，问题很多：
1、DPPH用无水乙醇溶的，然后实验出现了絮状沉淀。
2、空白组吸光度超过了1。
3、加了多糖样液的部分样品吸光度超过了空白。

多糖制备的时候是用醇沉的，多糖不溶于醇，DPPH又是用无水乙醇配的，正常情况下是会沉淀的吧？？？有没有办法解决这些问题呢？？？求教大神们了，很急啊！！
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1楼 2013-01-20 23:46:47
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七小艾

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 学无涯zsp at 2013-01-23 15:27:36
我也有用DPPH自由基来测样品的抗氧化能力，浓度为0.1mM的DPPH无水乙醇溶液在517nm下吸光度是0.9以上，所以不加抗氧化剂的空白对照中DPPH的浓度为0.1mM较好。我是用0.2mM的DPPH溶液和待测样品同体积混合。针对你的问 ...

是的呢，样液在醇里溶解性很差，我试过把糖浓度降到0.4mg/ml，在2ml乙醇里加入200微升糖液也沉淀了。。
看到论坛里有说用CMC乳化剂的，但是找不到相关的文献。。。
还有用DMSO溶解DPPH的，但是那个好像基本是用液相做的，不知道如果用分光光度计的话波长应该多少呢。
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9楼2013-01-23 17:58:42
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慧儿

银虫 (小有名气)
絮状沉淀应该是多糖吧，多糖不是水提醇沉么呵呵，空白组超过1，是不是因为你dpph浓度过高呢？加了样品的吸光度超过空白？那可能是你多糖不纯的，是不是里面参杂了别的色素之类东西呢......
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做个简单的人，不浮不躁不争不抢！
2楼2013-01-21 09:00:10
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水凝胶

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也遇到过这事由于糖浓度过高的原因，你把浓度降低就ok啦，
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3楼2013-01-21 11:23:46
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七小艾

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 水凝胶 at 2013-01-21 11:23:46
我也遇到过这事由于糖浓度过高的原因，你把浓度降低就ok啦，

低的话有效果吗？？因为我做ABTS的时候，浓度达到4mg/ml的时候自由基清除率也才达到50%多一点
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4楼2013-01-21 19:37:27
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