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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于引物设计的问题
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helu010924

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于引物设计的问题

我想问一下，我已经知道了一个基因的全基因组序列，想要扩增出全长，怎么设计一对引物，就一对引物。怎么弄？用什么软件，希望步骤越详细越好。从3‘UTR 区和5’UTR区怎么弄。急，谢谢
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宁愿笑着流泪，不愿哭着后悔
1楼2013-01-16 13:49:43
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helu010924

铁虫 (小有名气)
你没明白我说啥。。。
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宁愿笑着流泪，不愿哭着后悔
5楼2013-01-16 22:49:22
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你克隆基因的目的。如果是做表达的话，直接从起始密码子到终止密码子就可以了，不用管5'UTR和3'UTR。如果是原核生物的话，一对引物以基因组DNA为模板直接P。如果是真核生物有内含子的，需要以cDNA为模板P。
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2楼2013-01-16 14:17:12
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helu010924

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-16 14:17:12
不知道你克隆基因的目的。如果是做表达的话，直接从起始密码子到终止密码子就可以了，不用管5'UTR和3'UTR。如果是原核生物的话，一对引物以基因组DNA为模板直接P。如果是真核生物有内含子的，需要以cDNA为模板P。

是谷子里的某个基因。是要把全基因组扩增出来。
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宁愿笑着流泪，不愿哭着后悔
3楼2013-01-16 14:23:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by helu010924 at 2013-01-16 14:23:01
是谷子里的某个基因。是要把全基因组扩增出来。...

扩增基因的话你直接P就是了。不过基因里面是有外显子和内含子的。用来做表达的话要用cDNA。
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4楼2013-01-16 16:08:14
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