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筱臻儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质容易降解,怎么办?

我的蛋白一开始沉淀,换了一个标签,终于纯化出来一些,切标签后发现,蛋白没有了,蛋白不稳定,降解了,怎么办,求助!!!
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先纯化过程的BUFFER都要在冰上预冷使用,
其次纯化过程都要在4℃条件的冰库或者血液冷藏箱中进行,
最后buffer中需要加PMSF,DTT,TCEP-HCl之类的保护剂,还原剂。
5楼2013-01-16 11:04:57
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)

我们从华大蛋白好不容易搞来的蛋白样品,就放在4度保存,没有放到-80度,2个月后样品全坏了,现在还没有样品了。
2楼2013-01-15 12:50:04
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秋水素心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
纯化时试试在冰上处理,尽量减少冻融,少与塑料制品接触,最好用玻璃的。
认真过好每一天!
3楼2013-01-15 14:32:10
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
纯化样品时候是否加了蛋白酶抑制剂?
4楼2013-01-15 16:17:40
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