24小时热门版块排行榜    

查看: 2286  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lflishan

木虫 (著名写手)

[求助] western blot抗体选择与操作

如果一块胶转膜后需要用两种抗体,可以同时加两种抗体孵育吗?具体怎么操作呢?实验室没有人做过,急求助。。。另外,如果一种抗体是兔源的,而actin是鼠源的,二抗只有抗兔的,能用吗
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lflishan

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-15 10:01:10
我认为是指一抗本身是抗某种动物的某个蛋白,但也可以识别一些其他动物来源的同源蛋白。...

哦,谢谢,还以为是可以识别其他动物的二抗呢。。。
7楼2013-01-15 10:11:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

nlbtr

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lflishan: 金币+2, 有帮助 2013-01-14 22:19:46
第一个问题:可以同时孵育,我没做过,但是我知道有人做过,可以自己先摸索下,方法自己建立的才是最好的;
第二个问题,不行,要同源的。如果可以的话,二抗就不需要分来源了。
2楼2013-01-14 12:50:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoqi5992

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lflishan: 金币+2, 有帮助 2013-01-14 22:19:56
第一个问题:理论上可以,但是有些抗体混合在一起会产生沉淀,如果不产生沉淀的话,你可以摸摸条件,和一种抗体标的操作差不多。
第二个问题:只能用同源的,抗兔的二抗对应兔来源的一抗。
3楼2013-01-14 13:14:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lflishan: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-01-14 22:20:19
1. 如果两个目标蛋白在胶上的位置有明显差别是可以的,如果你不在乎把一抗混合的话。如果同时做,注意两个抗体的检出限要差不多。如果一个抗体很弱一个很强的话,效果会很不好。我一般是孵育完一个一抗,洗膜后直接放另一个一抗孵育,这样可以根据抗体的灵敏程度确定孵育时间的长短。洗膜后加二抗,两个一起检测。
2. 肯定不行的。二抗是识别一抗的IgG, 抗兔的二抗只能识别兔的一抗。
4楼2013-01-14 15:33:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:51 by xiangy672
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 能否申诉? +6 echo8914667 2026-08-30 7/350 2026-08-31 08:41 by kingkocxr
[基金申请] 面上意见出来了 +10 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 19/950 2026-08-31 08:01 by blueearth171
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见