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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于SphI酶的酶切问题
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lillian菲

银虫 (小有名气)

[求助] 关于SphI酶的酶切问题

最近在做酶切，用的酶是SphI酶，切的是Ptrc99a，上面有SphI这个酶的酶切位点，但做单酶切质粒，跑电泳的结果却是质粒被切成两段，很费解，求解
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1楼2013-01-10 20:29:07
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-01-10 22:19:45
没有什么费解的啊，因为Ptrc99a上有两个SphI酶切位点，你单酶切后当然是两条带
下面是我从addgene获得的Ptrc99a序列，SphI位点红色字体标出
GTTTGACAGCTTATCATCGACTGCACGGTGCACCAATGCTTCTGGCGTCAGGCAGCCATCGGAAGC ...

你好，您下面标注的酶切位点不是该质粒的多克隆位点，怎么切的呢？
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4楼2013-01-11 10:03:48
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gyesang at 2013-01-11 10:47:20
能否把你的这个质粒图谱发上来看看？...

这个就是质粒的图谱。谢谢大家的帮助，现在已解决

360截图20120827102553363.jpg
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7楼2013-01-12 09:51:58
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