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转基因猴子木虫 (正式写手)
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[求助]
重组大肠杆菌 镍柱纯化
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各位虫子 我最近遇到了一个头疼的问题 我构建了一株重组大肠杆菌，载体是pET8a，宿主是BL21(3) 用TB培养基发酵24小时后离心收菌，超声波破碎离心后，通过镍柱纯化。 今天SDS-PAGE结果显示在破碎后样品和上样后洗脱样品中有蛋白条带，而且很多。而在不同浓度的咪唑洗下来的溶液中没有条带。胞外酶液有很多条带。 总而言之，重组大肠杆菌发酵后有部分分泌到胞外，有部分在胞内。在胞内的呢，挂不住镍柱，虫子们，这是为什么呢？ 紧急求助啊 |
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snoopyzxx
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2楼2013-01-07 20:59:56
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~你的表达产物带有可结合到Ni2+上的氨基酸残基吗？ 4楼2013-01-09 11:27:54
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