应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA降解，求高人分析一下原因。
51/1返回列表
查看: 2991  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hjhjhj6

金虫 (小有名气)

[求助] RNA降解，求高人分析一下原因。

新手，提的斑马鱼肝脏和卵巢的RNA，takara的trizol，操作应该问题不大，枪头都是无RNA酶的。取样是新鲜样，20mg左右，1mltrizol，液氮和匀浆器法都试过，电泳图都差不多，5s条带特别亮。电泳液是TAE，DEPC水配置，找了很多原因，该注意的感觉都注意到了，DEPC处理什么的，但依然降解。氯仿、异丙醇没预冷，乙醇是-4度保存的，这个有影响吗？跟着别人的一起做也降解，别人的还好，是不是组织快还需要再小一点？
希望大家交流一下经验，一开始也提不好，后来把问题解决了的朋友说说问题出在哪里，供我参考。谢谢！
IM001245.Tif(2.66MB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DTfp.pPqUAQA570?p=130497
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
HakunaMatata~
1楼 2013-01-07 17:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hjhjhj6: 金币+3 2013-01-14 20:44:16
hjhjhj6: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-15 17:44:40
提RNA是挺难弄得，但是如果严格按照说明书就是没有问题的。
首先你样品研磨后一定要马上加上trizon
台子也要过夜照
最好用专用的工作台
整个过程要快就行了
赞一下 回复此楼
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
6楼2013-01-11 15:59:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

616057157

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hjhjhj6: 金币+3, ★有帮助 2013-01-14 20:43:44
hjhjhj6: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-15 17:44:09
亲，你在提取过程中要4度离心，且操作越快越好。你也要注意细胞数目和Trizol试剂的比列，裂解彻底，提取的RNA条带才好。
赞一下 回复此楼
不曾拥有何谈失去，不必伤心！！！
2楼2013-01-08 08:25:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hjhjhj6

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 616057157 at 2013-01-08 08:25:22
亲，你在提取过程中要4度离心，且操作越快越好。你也要注意细胞数目和Trizol试剂的比列，裂解彻底，提取的RNA条带才好。

谢谢  但这些都注意了啊。。。组织相对来说已经很小很小了  会不会是DEPC水的问题？  我水都是自己配置的  不是买的现成的
赞一下 回复此楼
HakunaMatata~
3楼2013-01-08 11:06:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言默haha

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hjhjhj6: 金币+5, ★★★很有帮助, 嗯，我换了下水，感觉好一些 2013-01-14 20:36:56
hjhjhj6: 金币+5 2013-01-15 17:44:21
你应该检查一下使用水的质量 可能水已经污染了
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-11 10:57:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:22 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:14 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭