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libolixuemei

铜虫 (小有名气)

[求助] 固体琼脂培养基上面有比10的5次方还多的大肠杆菌怎么计数，

请各路高手：固体琼脂培养基上面有比10的5次方还多的大肠杆菌怎么计数，可以用什么方法把细菌洗下来稀释了再涂板吗？或者有没有什么不伤害细菌的试剂可以溶解固体培养基的？
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1楼 2013-01-07 17:05:25
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1856029357

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不要想着把它稀释了，如果只有一种大肠杆菌，建议你挑去一个单菌落进行重新接种培养用液体培养基，然后培养时间短一点，然后取100ul的体积培养液分别稀释到无菌水中，梯度就试试100、1000两个试试好了，然后将稀释好的取100ul进行图板，然后培养计数。如果你不是一种大肠杆菌，那就比较悲剧了，方法就一种重做，按照上面稀释的方法进行图板，一定要图的尽可能的均匀。我以前就是做微生物群落和分离的。
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乱世出英雄，盛世皆狗熊
4楼2013-01-08 09:53:02
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wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先 你是不是问错地方了？该在微生物板块问吧？
其次 你划出一小块确定面积的方形 来计数 然后根据培养皿的面积推算出培养皿中的细菌数目
最后 除去培养基就算了 因为一加热你的菌就没有了 祝好运！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-01-07 22:00:35
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libolixuemei

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wy1518 at 2013-01-07 22:00:35
首先 你是不是问错地方了？该在微生物板块问吧？
其次 你划出一小块确定面积的方形 来计数 然后根据培养皿的面积推算出培养皿中的细菌数目
最后 除去培养基就算了 因为一加热你的菌就没有了 祝好运！
...

这个方法是个好方法但是对我的来说不适用，因为我的细菌是用气体处理过的不是直接涂布的那么均匀的分布在培养基上面，有些地放堆积着很多菌，有些地方又没有菌，所以这个方法对我来说不是很适用。我想最好是有什么方法可以把它们稀释一下再涂布培养最好了。
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3楼2013-01-08 09:38:35
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libolixuemei

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1856029357 at 2013-01-08 09:53:02
不要想着把它稀释了，如果只有一种大肠杆菌，建议你挑去一个单菌落进行重新接种培养用液体培养基，然后培养时间短一点，然后取100ul的体积培养液分别稀释到无菌水中，梯度就试试100、1000两个试试好了，然后将稀释好 ...

你说的这种平板计数法我知道的，但是我目前的状况是做灭菌处理用的大肠杆菌的初始浓度是很高的，大概在10的6次方，我需要知道处理不同时间的灭菌效果才能做出灭菌曲线，因此在处理时间短的情况下会有很多存活的大肠杆菌在固体培养基上面，我必须对着存活的计数才行啊
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5楼2013-01-08 10:52:44
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