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yuying.sw

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 113.9
帖子: 32
在线: 14小时
虫号: 1221431
注册: 2011-03-04
专业: 食品科学基础

[求助] 跑液相时梯度空跑也会出很大的峰，请问各位高手是怎么个情况啊？已有1人参与

是这样的，我做的是RP-HPLC，用的流动相是A：乙腈（0.1%TFA），B水（0.1%TFA），梯度为          A    B
                                    0.01 0    100
                                 25.00 100    0
                                       30    STOP
我先空针跑了四十多分钟，结果跑出来的竟然有很大的峰，重复了一下还是这样的情况，现在把图附上，跪求前辈指点

在线等~~~
未命名.jpg(46.67KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DaDiXzjqUAQA405?p=130497

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1楼 2013-01-07 10:52:29

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lu_lu_1022

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 17.3
帖子: 3
在线: 1.6小时
虫号: 1141841
注册: 2010-11-08
性别: MM
专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+2, 谢谢你的解答，有空常来分析板块 2013-01-08 11:18:24

是不是，走流动相的管子里有气泡，或是之前你没有排气，柱子里有气泡呢，先看看你的柱子是用什么封柱的，先用封柱的溶剂冲，再调整配比梯度到你的流动相上。
看过图后，觉得你柱子没冲干净，之前应该先根据柱子的类型用有机溶剂冲一下，比如我做C18柱，就是先用95%甲醇冲30min以上，再用5%甲醇冲30min以上，再用我的流动相低流速冲