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yuying.sw

新虫 (初入文坛)

[求助] 跑液相时梯度空跑也会出很大的峰,请问各位高手是怎么个情况啊? 已有1人参与

是这样的,我做的是RP-HPLC,用的流动相是A:乙腈(0.1%TFA),B水(0.1%TFA),梯度为             A       B
                                      0.01    0       100
                                     25.00    100      0
                                         30      STOP
我先空针跑了四十多分钟,结果跑出来的竟然有很大的峰,重复了一下还是这样的情况,现在把图附上,跪求前辈指点在线等~~~
未命名.jpg(46.67KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DaDiXzjqUAQA405?p=130497
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butterfly631

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-01-08 08:53:46
三种方案:
用洁净的容器重新配置流动相,保证流动相配制过程不混入其他杂质,
1.以流动相为样品进针,防止六通阀中有空气进入柱子,看峰的位置及峰形如何;
2.流动相不变,还以流动相为样品进针,更换一个没问题的柱子,看结果如何,此步排查是不是色谱柱的问题;
3.如果以上两步的结果与之前相比都没什么变化,那么把柱子放到另一台没问题的色谱仪中,用相同的流动相作样品进针,看结果如何,此步排查色谱仪泵系统问题。
如果以上都试过,结果都跟之前一样,那就考虑配制流动相的水相、乙腈、三氟乙酸是不是已经被污染了?
12楼2013-01-07 19:07:07
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查看全部 28 个回答

yuying.sw

新虫 (初入文坛)

我说的空针就是空掰进样阀~~~
2楼2013-01-07 10:55:58
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BUU-2011

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
强烈怀疑管道有残留,建议反复充。
3楼2013-01-07 11:30:19
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yuying.sw

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by BUU-2011 at 2013-01-07 11:30:19
强烈怀疑管道有残留,建议反复充。

那有没有可能是柱子或流动相的问题呀?但是我感觉我的流动相应该没有问题~~~您经常做液相么?能不能留个QQ方便联系呀?
4楼2013-01-07 11:37:21
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