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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 真是热心的虫虫啊,鼓励积极交流问题 2013-01-07 16:57:17
1. 简并序列没有关系的。如果你是做蛋白表达,只要氨基酸序列对就可以了。主要是看密码子不能有表达宿主的稀有密码,否则表达效率上不去。
2. 不知道你想在什么载体和宿主里表达。无论怎样,一般的表达载体都有启动子和终止子,不需要原来基因的启动子和终止子,你只需要把序列从启动密码子到终止密码子这一段克隆出来就可以了。至于所加酶切位点,你需要根据所选的表达载体来设计。
3. 阅读框什么的没有关系的,翻译的时候是寻找启动子下游附近的ATG开始表达的。你主要设计好你的序列,从启动子到你的目的基因开头的一段最好只有一个ATG,否则可能会有多个翻译产物。
最后的问题问的不是很清楚,你是让公司给你克隆基因序列吗?如果只是合成引物,是否好用还是自己实验说了算吧。只要能克隆出正确序列就可以了。
2楼2013-01-07 03:20:16
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