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zzkk0602

金虫 (小有名气)

[求助] 急急急!PI3K信号通路

我主要做化学,因为实验涉及一点信号通路的知识,所以向大家请教一下。
PI3K/Akt信号通路的活化
我想问,我做了空白组,模型组,给药组,理想的结果应该是模型组Akt磷酸化水平很高,空白组正常,给药组介于模型组和正常组之间,但现在的结果是有的给药组有的组别,Akt磷酸化水平低于正常组。我想问一下,我可不可以下这样的结论:部分给药组抑制了PI3K的活化,使Akt磷酸化水平下调?怎么样说专业一些呢?希望大家给点意见。如果答案很好,我会追加金币数的。谢谢!
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zzkk0602

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-05 13:14:44
给你这个网址,除了简单的叙述,还有大量的文献参考http://www.keratin.com/aa/aa012.shtml

这个网址都是在讲头发护理的啊!
3楼2013-01-05 16:56:53
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普通回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zzkk0602: 金币+1 2013-01-06 13:30:59
kx444555: 金币+1, 鼓励分享 2013-01-09 12:04:39
给你这个网址,除了简单的叙述,还有大量的文献参考http://www.keratin.com/aa/aa012.shtml
shine
2楼2013-01-05 13:14:44
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zzkk0602: 金币+2 2013-01-06 13:30:51
不能这么快下结论吧
“有的给药组有的组别,Akt磷酸化水平低于正常组”
意思是不同的药有的药升高有的药降低?做过统计分析了么?
Akt磷酸化水平的定量是不是满足要求?
都确认之后最好再换个实验方法说明一样的结果,才更有把握
4楼2013-01-05 17:41:04
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sc5921041

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zzkk0602: 金币+2 2013-01-06 13:41:35
Our lab focus on PI3K... it is a very complex pathway for cancer biology.  
1. How do you calculate the phosphorylation level of AKT?
2. PI3K has many feedback effects, that is to some extent, phosphorylation of AKT can prevent its further activation by the kinase. What conclusion you want to make? And what model do you use?
nostalgia
5楼2013-01-06 07:13:46
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zzkk0602

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ccharlien at 2013-01-05 17:41:04
不能这么快下结论吧
“有的给药组有的组别,Akt磷酸化水平低于正常组”
意思是不同的药有的药升高有的药降低?做过统计分析了么?
Akt磷酸化水平的定量是不是满足要求?
都确认之后最好再换个实验方法说明一样的 ...

给药组有四组,分别给予不同的药物,结果已做过统计,Akt的磷酸化水平有的低于正常组。我做定量用的是Image Lab 3.0软件。WB不是半定量的方法吗?统计出来的数值都是相对值。看的是趋势。我想知道的是PI3K活化后可以导致Akt的磷酸化,如果Akt的磷酸化水平低于正常组,是否可以下这样的结论:某药物可能可以抑制Akt的磷酸化?抑制PI3K的活化?
6楼2013-01-06 13:30:43
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zzkk0602

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sc5921041 at 2013-01-06 07:13:46
Our lab focus on PI3K... it is a very complex pathway for cancer biology.  
1. How do you calculate the phosphorylation level of AKT?
2. PI3K has many feedback effects, that is to some extent, pho ...

我做的并不是癌症方面的机制。
1. 用的是Image Lab 3.0软件对条带进行分析。分析完后会有Int值,进行比较。
2. 你的第二点因为是英文表述,所以我不是完全理解您的意思。我的实验大致分三组:给药组(给予不同药物),正常组〔什么药物都没给〕,模型组〔会使PI3K活化〕。现在的结果是,有的给药组的Akt磷酸化水平低于正常组。这种情况我不会分析。是否是给药组比正常组更加抑制PI3K的活化?就是结论我不会表达。因为不是分子生物专业的,对这块不熟悉,希望专业人士给与指点。
7楼2013-01-06 13:41:23
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zzkk0602: 金币+10 2013-01-09 09:38:49
引用回帖:
6楼: Originally posted by zzkk0602 at 2013-01-06 13:30:43
给药组有四组,分别给予不同的药物,结果已做过统计,Akt的磷酸化水平有的低于正常组。我做定量用的是Image Lab 3.0软件。WB不是半定量的方法吗?统计出来的数值都是相对值。看的是趋势。我想知道的是PI3K活化后可 ...

WB的半定量做不得准的,得看差别有多大了,如果差异非常明显还是有点说服力。
单一实验就下结论还太早,即使结果非常有说服力也只能说明你检测的Akt磷酸化水平降低,要跳到抑制PI3K的活化,还需要别的实验验证
8楼2013-01-06 17:43:24
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9楼2013-01-06 18:20:44
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sc5921041

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zzkk0602: 金币+10 2013-01-09 09:31:02
引用回帖:
7楼: Originally posted by zzkk0602 at 2013-01-06 00:41:23
我做的并不是癌症方面的机制。
1. 用的是Image Lab 3.0软件对条带进行分析。分析完后会有Int值,进行比较。
2. 你的第二点因为是英文表述,所以我不是完全理解您的意思。我的实验大致分三组:给药组(给予不同药 ...

能得到数值是否就能运用统计学计算两组之间的p value呢? 如果能的话就可以下结论啊,我对磷酸化的定量没有经验,不知道你说的数值是否可以这样算。
我说的第二点其实跟你的研究并没有太大关系因为你们只是简单地做出药物分析,并没深入到具体的信号转导调控中。
nostalgia
10楼2013-01-06 23:32:04
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