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WAX2010银虫 (小有名气)
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[交流]
我可能发现了一种新奇的生物发光现象已有19人参与
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实验过程中发现了一个新奇的发光现象，想研究一下却不知从何入手，希望各位前辈为我指点迷津。 我是细胞生物学专业的一名学生，平日主要从事细菌展示技术的研究，所用的细菌是大肠杆菌MC1061，内部有一个可诱导表达GFP和CM抗性的表达载体。实验过程中需要对细菌离心和清洗，我一般采用3000g，5min离心，离心后会把上清的LB倒到一个小废液缸里，清洗用的PBS也会倒入这个废液缸，偶尔少量的菌液也会倒入此废液缸，由于实验比较忙，废液缸里的废液并非天天处理，有时候我看到里面浑浊或者表面漂了一层微生物，我都会加入新吉尔灭或者75%的酒精灭菌。前段时间有一次，我加入酒精后摇了摇，发现本来微黄的液体变成了蓝绿色，我感觉很新奇但也没太在意，就把废液处理掉了，并把废液缸用清水涮了涮。接下来一次废液中加了一点75%酒精后又出现了一样的现象。一开始我想是不是里面污染了其他的细菌或真菌，便把废液吸出来，3000g，5min离心，可见有白色的细菌离下来，但上清依然是蓝色的，我把蓝色的上清放到紫外灯下，可以看到有很亮的蓝白色荧光，而离心下来的细菌，PBS重悬后却看不到荧光，即使将我们诱导GFP表达的菌PBS重悬后在紫外灯下也是看不到荧光的。我想上清有蛋白？我又把上清10000g，5min离心，并没有看到有任何东西离心下来。因此上清中是不是产生了一种新的发光物质。我对这个现象很感兴趣，因此把废液收集了起来。放置了一夜后蓝绿色又变成了浅黄色，振荡摇动液体，液体慢慢从浅黄色变成浅蓝色又变成蓝绿色（以上现象可能说明变成蓝色液体与酒精无关），而且随着放置时间的延长，里面长起来的菌越来越多，摇动液体使其由黄色变成蓝绿色花的时间也越来越长，这是不是说明里面某种物质在有氧存在的情况下可以发出蓝光？但是我离心收集的上清放在EP管中一直是浅蓝色的呀，颜色的变化也不一定依赖氧的存在，还是二氧化碳的存在抑制了蓝绿色的显现。上网查到有发光细菌，我看到的现象与发光细菌不同，发光细菌是在黑暗中看到光，而我观察到的是在可见光下有蓝绿色，紫外激发下也可产生荧光。 我也试图从这个废液中挑出感兴趣的菌，我先取出少量废液，加入到含有CM的LB中，发现菌长的很慢，而且长起来后，怎么摇动也没有看到变色的现象，放在紫外灯下也没看到有很强的荧光。 我又取了一点废液到无CM的LB中，菌长的还可以，就是也没看到变色现象？ 下一步该怎么办呢？？ 希望大家多多指点，谢谢 [ Last edited by WAX2010 on 2013-1-3 at 14:30 ] 谢谢大家的建议，由于老板反对进行尝试研究，菌种已被处理了…… [ Last edited by WAX2010 on 2013-10-8 at 14:42 ] |
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