24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 13.4
帖子: 124
在线: 25.3小时
虫号: 1634309
注册: 2012-02-22
性别: GG
专业: 系统生物学

[求助] 目的基因构建载体方向问题概念有点不清楚，请教各位大侠

目的片段构建质粒载体时，目的片段连接到多克隆酶切位点上，
1、基因片段的方向要和多克隆酶切位点的转录方向一样，这里目的片段的方向怎么理解，有ATG的就是上游，然后上游往下游转录？
2、多克隆位点有T7启动子，转录的起始识别启动子后就开始了，启动开始后后面的序列就开始转录了，那启动子后面的基因序列就不需要所谓的方向了，都会根据序列被转录合成肽连，翻译时识别起始密码子AUG就能确定翻译方向了？
请各位大侠指点，小弟新手，不胜感激！

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

虫友问答-分子生物

» 猜你喜欢

1楼 2013-01-01 22:29:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 13.4
帖子: 124
在线: 25.3小时
虫号: 1634309
注册: 2012-02-22
性别: GG
专业: 系统生物学

引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-02 02:37:13
感觉LZ不是学生物的吧，这些问题都是很基本的，稍微看一下书就可以明白。
所谓方向就是你克隆的DNA片段上的基因是有方向性的，从ATG起始到TAA结束的。所谓启动子是指RNA聚合酶结合的地方，RNA聚合酶识别启动子下游 ...

我也查了权威资料了，资料上说RNA聚合酶是从转录起点开始转录，转录起点后的称为下游，以上为上游，貌似不是从ATG开始转录的，那么就可以转录出后面的序列？忘希望大侠指教

赞一下

回复此楼

5楼2013-01-03 13:39:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 6 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-01-02 11:47:12
sunbeartao: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-01-03 13:40:46

感觉LZ不是学生物的吧，这些问题都是很基本的，稍微看一下书就可以明白。
所谓方向就是你克隆的DNA片段上的基因是有方向性的，从ATG起始到TAA结束的。所谓启动子是指RNA聚合酶结合的地方，RNA聚合酶识别启动子下游附近的ATG，以其互补链为模板转录出mRNA。mRNA是单链且有方向的，除去上游的非翻译区，核糖体是以mRNA上的AUG为起始从5'开始翻译的。所以说，你的目的基因插入在启动子下游的CMS处的时候，必需是从ATG到TAA方向的。反过来插入的话，你的序列就不是原来的ATG到TAA了。也就得不到正确的mRNA序列了。

赞一下(3人)

回复此楼

2楼2013-01-02 02:37:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖