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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB转膜后出现的问题
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ljapril

新虫 (初入文坛)

[求助] WB转膜后出现的问题

做WB，需要转一个快300KD的蛋白，转完膜后发现上面的泳道特别清楚，这是怎么回事呢？之前做过一些100一下的蛋白，转过的膜都是白色的，什么都看不到的，这次很奇怪，有谁晓得这是怎么回事吗

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1楼2013-01-01 21:29:28
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ljapril

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-02 02:07:58
如果染色前就是这个样子，感觉是你的膜干了。用的是湿法还是半干转移？是不是电压、电流有些高，或者转膜时间长了。

湿转，两个半小时，250mA，因为蛋白分子量大，就多转了会，这样对结果有什么影响呢？
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8楼2013-01-02 09:29:04
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Lester11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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染色后还是染色前的图像？
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2楼2013-01-01 21:36:41
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Lester11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
ljapril: 金币+1, ★有帮助 2013-01-07 09:47:56
如果染色后出现清晰的泳道，那就说明western blot和转膜效果还不错，但是染色前这样那就说不通了。
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Followyourheart!
3楼2013-01-01 21:39:25
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ljapril

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Lester11 at 2013-01-01 21:39:25
如果染色后出现清晰的泳道，那就说明western blot和转膜效果还不错，但是染色前这样那就说不通了。

这是丽春红染后又洗掉的样子，但是膜刚拿出来是也和这个差不多哦
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4楼2013-01-01 21:47:23
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