| 查看: 680 | 回复: 2 | ||
[求助]
求MTT方法步骤及原理大全！！
|
| 如题 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有263人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求解：原子吸收原理、概念介绍、操作方法步骤、注意事项
已经有4人回复
- MTT溶解过程中，如加热过高还可以用吗？
已经有4人回复
- 求：用PBS脚本提交MS任务具体步骤
已经有4人回复
- 请教用TOES和APTES给金属氧化物NPs修饰氨基的原理和步骤！！！
已经有5人回复
- MTT法测活细菌数的具体操作步骤
已经有5人回复
- 【求助】Siesta 求siesta软件和安装步骤
已经有8人回复
- 【求助】木质素的显色反应的原理，步骤
已经有5人回复
zhaodahe
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 220 (大学生)
- 金币: 1796.6
- 红花: 7
- 帖子: 461
- 在线: 378.5小时
- 虫号: 552612
- 注册: 2008-04-30
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
2楼2012-12-27 20:41:26
|
???????,???????????????????,????а??? MTT??????????????л?????3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT?????????????MTT????????????????????????????????????????????????е?????????????????????????????C????????tetrazolium????????????????formazan????formazan????????????????????????????????????????????????????????MTT???????????????formazan???????50%??N,N-?????????????20%???????????????pH 4.7????MTT???????????????????490 nm????????OD??????????????????????????DMSO????? MTT??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????á? MTT????????? 1????????????ú?10???С????????????????????????????? 1000??10000??????????96??壬??????200ul. 2:???????????????????????????3??5?????????????????????????????? 3???????????3??5???????MTT?????5mg/ml??PBS ????????4С????????????С?????????????????????????????????????????????????????????????????150ul DMSO????10??????????????? 4??????????490nm????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ??????? ??1????????????????????? ??2?????????????????С??10??????????????????????顣?????????????????????????? ??3??????????????????в?????????????????????????????鲽?豣?????????????????? MTT??????????????0-0.7????????????Χ???????????? IC50?????????????????????50???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????50??????????????????????IC50???????2?????????????????????????? ???????????????0.1??0.01??0.001??0.0001??0.00001??0.000001?????????10?????????0.1?????????0.95?? 0.80??0.65??0.43??0.21??0.06?????? ??????? Pm=0.95 Pn=0.06 P=0.95+0.80+0.65+0.43+0.21+0.06=3.1 Xm=lg0.1=-1 lgI=lg0.1/0.01=1 lgIC50=-1-1*(3.1-(3-0.95-0.06)/4)=-3.6025 IC50=0.00025 ????????????ο?; lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4) Xm:lg ?????? I:lg(??????/???????) P:??????????? Pm:??????????? Pn:??С???????? ??????=1-?????OD?/??????OD? ????е??????С????????????????С?????? ???? ??96???????SMMC-7721?????MTT?????????,??ü????1640??????,????MTT??DMSO?????????????????200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO ??DMSO?????????????????????DMSO?????H???????б???? ??????4000???????????????????20000??/ml??MTT??20ul????????С??????????????????????????????????150ul DMSO??????????????10???????????????? ????????IC50????????????????????????????????????????????????1/2-1/3??IC50??????????36h???????????????????????????????1%???????????5-10%??Annexin V??????????????G0????????. MTT??????Щ??????? (?)??? 1.????????????????????????????96???????????????????????????105?????????????????????????????????????????MTT?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????MTT???γ?????????????? ??????????????????????????????????????????? 2.????????趨??????????????ο???????????????????Χ??????????????????????С???????Χ???????м??????????????????????????????????Ч??????? 3. ??????趨????????????OD???????excel???????????????????????仯??????????仯?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 4.???????200ul???????????10??4??5?η???????????????????????68h????????????????????????????????????G0??????????????????????????48h?????? 5.MTT??????????????????????????????????????????MTT??????????????????????????????MTT???OD???????? 6.????δ?????????????????????????????? 7.????????????????????????????????????????MTT???????????????????????????????????????MTT?????????????????????????????????????????????????????? 8.????????????ú?15?????????????????????????????????????????????????????????鱾????????????????????????????С??10????????????????С???????????????????????????????? (??)??鲽?? ????????? 1.??????????????????????????????????100ul,??????????????????1000-10000???????????????PBS????? 2.5%CO2??37????????????????????????96?????壩,??????????????,???????????????????????С??????????????????????????????壬??????????.???5-7?????,???100ul,??3-5??????.??????5???????????????????? 3.5%CO2??37?????16-48С???????????????? 4.??????20ulMTT?????5mg/ml????0.5%MTT????????????4h?????????MTT???????????????????????????С????PBS??2-3????????MTT????????? 5.?????????С???????????????? 6.??????150ul???????????????????????10min?????????????????????????OD490nm?????????????????? 7.???????????????????MTT??????????????????????????????????????????????????MTT????????????? ????????? 1.???????????????????????????1??106/ml?????????????1640??????壩??????40ul ?????Actinomycin D???ж????10ul?????????? l?g/ml??????????????????1:10-1:20)??????????10ul??????????50ul????5??104cell/???????100ul????96??壨???????????????????????????100?(?????100 1640???? 2.??37?棬5%CO2????16-48С???????????????? 3.??????10 ul MTT?????5 mg/ml????0.5%MTT????????????4 h?????????????????WST-1??????4 h???????????4??????????????????OD570nm??630nmУ??????????????????? 4.?????1000?x10min????С?????????壬??????100 ul???????????????????????10 min?????????????????????????OD570nm??630nmУ??????????????????? 5.???????????????????MTT??????????????????????????????????????????????????MTT???????????????????趨3????? (??)MTT?????? MTT???????????????????4oC?????????????Ч?????????5mg/ml??????-20???????棬??????????????С??????????????????????????????????????????????MTT??????EP??????????????????????????м??????????????????,????MTT???????????????????????? MTT???°??????????С??,?????????????????????????.????MTT????????MTT????????У???96?????????????й???????????????????????????????????????????????? ????MTT???PBS???,????????????????60????????? PBS??: Nacl 8g Kcl 0.2g Na2HPO4 1.44g KH2PO4 0.24g ??ph 7.4 ????1L (??)????????????(???) ???????30????????????,???????????;????????ú?????????壩??????????????????????????顣 ?????????????????????????????, ???????????10000/ml?????????????OD??????伴????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????MTT??????????10000/ml??100ul/??? ?????????????????????????.???????????????????д??????????С???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????á????????????????????105,??????????103-104. |
3楼2012-12-31 14:31:25
