24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1167  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

路程

新虫 (初入文坛)

[求助] 目的片段丢了一截

求指教,最近做TA克隆,目的基因和T载体连好后转化,挑单克隆提质粒,可是目的基因丢了好大一段,变小了,有虫友遇到相同问题吗,怎么解决的呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1. 质粒是超螺旋,不切开电泳看不出确切的分子量,和Marker比是没有意义的
2.  建议测序后再说少没少,如果的确少了,最有可能的情况是一条引物的末端有重复序列,测序后自然就知道了,解决方法是把引物加长,用高退火重新扩。
生命不息,探索不止。
8楼2012-12-30 12:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Lester11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-28 17:25:43
这个问题我们实验室的一位师兄遇到过,挺麻烦的。
你看一看你的目的基因是不是有部分GC含量很高,这样的话PCR可能就跳过了那一部分,P出来的基因少一片断。
遇到这种情况你要换一种更有效的针对高GC的内切酶。
试试看吧,这种问题比较常见,多尝试,也是一个成长的过程。
Followyourheart!
2楼2012-12-27 19:29:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看看丢掉的那一段是不是重复序列
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2012-12-27 20:53:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyqdyk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 股鼓励交流 2012-12-28 17:25:56
目的基因少了一段是指菌落PCR结果还是测序结果?
如果菌落PCR结果有可能你用的T载体的通用引物与基因上的一段序列相同或类似,再有可能染菌。
如果是测序结果得到的只是一段我就不是很明白了,个人认为这种情况一般不会出现。
4楼2012-12-28 11:17:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +19 叶zilin 2026-04-13 20/1000 2026-04-14 00:23 by 福农资环_环境基
[考研] 08工学 309分求调剂 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-13 22:50 by pies112
[考研] 310求调剂 +15 666真好 2026-04-11 17/850 2026-04-13 22:27 by pies112
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +21 ioodiiij 2026-04-08 21/1050 2026-04-13 20:40 by biomen
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 293求调剂 +6 勇远库爱314 2026-04-08 6/300 2026-04-11 10:08 by zhq0425
[考研] 282,求调剂 +12 jggshjkkm 2026-04-09 14/700 2026-04-11 09:39 by 猪会飞
[考研] 化学工程与技术324调剂 +23 孙常华 2026-04-09 25/1250 2026-04-11 00:07 by 骑牛渡寒江
[考研] 22408 366分,本科211,一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 263分B区求调剂 +6 李nihao 2026-04-08 6/300 2026-04-08 09:38 by 南开小綦
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
信息提示
请填处理意见