2楼: Originally posted by Lester11 at 2012-12-27 19:29:22
这个问题我们实验室的一位师兄遇到过，挺麻烦的。
你看一看你的目的基因是不是有部分GC含量很高，这样的话PCR可能就跳过了那一部分，P出来的基因少一片断。
遇到这种情况你要换一种更有效的针对高GC的内切酶。
试 ...

3楼: Originally posted by gyesang at 2012-12-27 20:53:13
看看丢掉的那一段是不是重复序列

4楼: Originally posted by zyqdyk at 2012-12-28 11:17:14
目的基因少了一段是指菌落PCR结果还是测序结果？
如果菌落PCR结果有可能你用的T载体的通用引物与基因上的一段序列相同或类似，再有可能染菌。
如果是测序结果得到的只是一段我就不是很明白了，个人认为这种情况一 ...

9楼: Originally posted by Arrennew at 2012-12-30 12:21:40
不好意思，没看到别人的回帖，测序了就是第二种情况了，引物末端有重叠，4个碱基就能扩出来，我遇到过这种情况，把引物加长五六bp就行了。