24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3534  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR不出目的条带的原因

各位虫友们,小女子有问题想请教,望大家给出宝贵意见。
为什么PCR同一个基因,同一个模板,换了引物,但每次p出来的条带都在500左右的样子啊?目的条带是2000时,p出来的是500,目的条带是1500时,p出来也还是500,我们排除了引物、模板、酶、buffer等原因,退火温度也尽量低,但为什么还是得不到目的条带呢?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

PCR技术

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

喜欢生物,所以想好好研究下去!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
退火温度不是越低越好的,你可以考虑摸索一下退火温度,引物单上的Tm降5度,然后上下浮动2-3度进行摸索。找到合适的Tm。
virus
9楼2012-12-27 09:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

jimjohntall

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看一下延伸时间是不是改变了。这种情况我认为是引物的问题应该是引物没有设计好,易形成二聚体或者发卡结构引起的
2楼2012-12-26 18:37:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果美女排除了引物、模板、酶、buffer等原因,那么除了水,只有可能是你的引物设计上问题了。建议重新设一对引物扩扩看,同时那一对已知可用的引物扩一下做阳性对照,祝美女实验顺利!
3楼2012-12-26 18:40:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liudianlei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物设计的有问题
4楼2012-12-26 19:09:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +15 花田半亩~白 2026-04-21 15/750 2026-04-23 00:09 by prepg
[考研] 有没有学校收留 +3 蒋昌鹏qtj 2026-04-20 3/150 2026-04-22 20:25 by 学员JpLReM
[考研] 312求调剂 +3 山河似你温柔 2026-04-22 3/150 2026-04-22 20:17 by 学员JpLReM
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +5 yexuqing 2026-04-19 5/250 2026-04-22 10:01 by easeheart
[论文投稿] 急需审稿人!!! +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
请填处理意见