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jiaxingchen

银虫 (小有名气)

[求助] 厌氧细菌生长条件

各位大侠好:
       向大家请教一个问题,就是,我们有一人肠道厌氧性细菌,为什么在厌氧琼脂平板上能长,而在厌氧液体培养基里生长不了呢?厌氧琼脂的成分及含量(除了琼脂)与厌氧液体一样,厌氧琼脂是61g溶于1L蒸馏水中,而厌氧液体是46g溶于1L蒸馏水中。这种细菌与另外两种人肠道厌氧性细菌混合培养时,能够在厌氧液体培养基中生长。厌氧琼脂培养是将平板放在密闭的乐扣盒中,加两代厌氧产气袋。厌氧液体培养是在培养基上层加石蜡,隔绝空气。谢谢各位了,O(∩_∩)O
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-27 15:22:47
jiaxingchen: 金币+10 2013-01-18 09:19:40
试试在液体里加0.5g/L L-半胱氨酸盐酸盐

这一般在培养双歧时添加用做除氧剂,毕竟你的液体培养基里还是可能含有氧的
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
2楼2012-12-26 09:10:57
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lark001

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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rainwander: 金币+3, 鼓励交流 2012-12-27 15:22:56
jiaxingchen: 金币+20 2013-01-18 09:19:28
(1)可能在培养基上层加石蜡,隔绝空气的方法不能做到完全厌氧;其次,接种时可能没有保证厌氧。
     楼主考虑以下向厌氧液体培养基中曝入氮气,将里面的空气排干净,然后密封,再在厌氧条件下接种培养。
(2)考虑下细菌生长的适宜条件(温度、pH、振荡速率、盐类浓度等)
(3)这种细菌与另外两种人肠道厌氧性细菌混合培养时,能够在厌氧液体培养基中生长。
     是不是有协同共生作用,单独任一种或两种组合共生会如何?厌氧平板和液体不妨都试一下。
3楼2012-12-26 10:04:46
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jiaxingchen

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-12-26 09:10:57
试试在液体里加0.5g/L L-半胱氨酸盐酸盐

这一般在培养双歧时添加用做除氧剂,毕竟你的液体培养基里还是可能含有氧的

可是厌氧液体培养基里已经含有0.5g/L的半胱氨酸了?
4楼2012-12-26 12:56:27
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jiaxingchen

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lark001 at 2012-12-26 10:04:46
(1)可能在培养基上层加石蜡,隔绝空气的方法不能做到完全厌氧;其次,接种时可能没有保证厌氧。
     楼主考虑以下向厌氧液体培养基中曝入氮气,将里面的空气排干净,然后密封,再在厌氧条件下接种培养。
(2) ...

非常感谢,可是平板操作时也是在空气中啊?另外两种菌能单独生长,其中任一种跟这种细菌混合,也都能生长。还有就是,乐扣盒中的厌氧产气袋,能把平板里的氧气消耗掉么?O(∩_∩)O谢谢
5楼2012-12-26 13:09:24
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jimjohntall

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-27 15:23:04
jiaxingchen: 金币+5 2013-01-18 09:20:02
我也认为是液体培养的条件不够,虽然说深层液体培养是可以达到厌氧条件的,但也跟是不是极严格厌氧菌有一定的相关性,好多严格的厌氧菌也是在空气中操作,只是与空气的接触时间要严格控制,尽可能缩短。
6楼2012-12-26 18:32:00
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-27 15:23:13
jiaxingchen: 金币+5 2013-01-18 09:20:06
感觉楼上方法较九:向厌氧液体培养基中曝入氮气,将里面的空气排干净,然后密封,再在厌氧条件下接种培养。
7楼2012-12-26 21:29:14
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jiaxingchen at 2012-12-26 12:56:27
可是厌氧液体培养基里已经含有0.5g/L的半胱氨酸了?...

8楼2012-12-27 08:57:37
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jiaxingchen

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zzjcust at 2012-12-26 21:29:14
感觉楼上方法较九:向厌氧液体培养基中曝入氮气,将里面的空气排干净,然后密封,再在厌氧条件下接种培养。

请问要是向厌氧液体里充入氮气的话,氮气通过滤膜除菌么?感觉操作不太方便啊?O(∩_∩)O谢谢
9楼2012-12-27 09:08:05
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杳不知44

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by jiaxingchen at 2012-12-27 09:08:05
请问要是向厌氧液体里充入氮气的话,氮气通过滤膜除菌么?感觉操作不太方便啊?O(∩_∩)O谢谢...

先除氧再灭菌
10楼2016-03-16 15:16:02
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