应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳中个条件与蛋白聚体的关系
51/1返回列表
查看: 1384  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Allen206

银虫 (小有名气)

[交流] 电泳中个条件与蛋白聚体的关系 已有4人参与

我有个问题搞不懂啊，电泳中各个条件与蛋白是否解聚的关系，有以下几点：
1.样品煮沸能使蛋白解聚么？就是由亚基组成的蛋白解开成为单体
2.SDS能使由亚基组成的蛋白解聚么？
3.SDS-PAGE中，很多人用含有2ME,SDS和    没有2ME,有SDS的样品处理液，根据结果断定蛋白的亚基组成，这样对么？
4.如果SDS能使蛋白解聚，那么是不是只有用Native-PAGE才能鉴定蛋白的真实分子量啊？
小妹是新人，希望同仁们指点啊，先谢过了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
不想说什么，，，，
1楼 2012-12-25 16:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奔跑吧蛋白

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-25 17:09:39
1. 煮沸样品可以是蛋白质变性。如果buffer中没有象SDS之类的去垢剂不能使亚基之间的作用完全解开。
2. SDS可以破坏亚基之间的疏水作用和氢键，从而使多亚基复合体解聚。
3. 加入巯基乙醇的目的是把二硫键还原成-S ...

我想求教一下，跑非变性电泳时，血清中的抗原抗体复合物会分开吗，还是仍然以复合物的形式存在

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-10-10 22:06:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1. 煮沸样品可以是蛋白质变性。如果buffer中没有象SDS之类的去垢剂不能使亚基之间的作用完全解开。
2. SDS可以破坏亚基之间的疏水作用和氢键，从而使多亚基复合体解聚。
3. 加入巯基乙醇的目的是把二硫键还原成-SH。有些蛋白质会靠二硫键形成二聚体，或者有亚基之间二硫键，光靠SDS不能使其完全解开。
4. SDS-PAGE来判断蛋白质的分子量实际上的单体亚基的分子量。如果你需要确定多亚基组成的蛋白复合体的分子量，加入SDS会破坏亚基之间的作用，只有在native条件下做。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-12-25 17:09:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mguo15

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看来你喜欢电泳，可以用尿素梯度与胶梯度的混合胶，得到非常好的蛋白解聚曲线。不过制胶有点难度，可以了解它，不推荐你做。
SDS 对膜蛋白有保护作用，所以你的问题最好一对一而定。cicelyzh 的解答还是比较标准的。
Native gel not the best. 其他的色谱之类更好。不过PAGE肯定是最便宜的。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-12-26 00:02:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果你蛋白本身就是单体而且可以单体稳定存在，那变性胶是没有问题的
native可以判断天然存在形态。是对结构的判断，就是说你变性胶的分子量可能是native的一部分
通常蛋白在高温态很不稳定
赞一下 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
4楼2012-12-26 11:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭